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chidaoqie

铜虫 (初入文坛)

[求助] 新手做细胞HE染色求助 已有2人参与

新手做he染色,爬片后的活细胞染色。。染成这样了请问哪里不对主要疑问看不出红色,都是蓝紫色,还有特别深色的部分是否是染料没有洗干净?
新手做细胞HE染色求助
步骤是
(1)先将长有细胞的盖玻片用PBS洗3次
(2)将盖玻片浸入95%的酒精固定15分钟
(3)PBS洗2次,每次1分钟
(4)浸入苏木素染液,染色5分钟
(5)自来水浸洗
(6)浸入稀盐酸酒精进行分色,数秒
(7)自来水浸洗
(8)浸入淡氨水中,使胞核蓝化,3分钟
(9)自来水浸洗
(10)浸入伊红染液,染色5分钟
(11)自来水浸洗
(12)依次经过75%、85%、95%酒精各1次,95%酒精1次和100%酒精2次逐级脱水,每次3分钟。
(13)1:1无水乙醇+二甲苯,3分钟
(14)通过二甲苯2次,每次3分钟
最后滴上中性树胶,将有细胞的一面向下固定于载玻片上。
步骤是
(1)先将长有细胞的盖玻片用PBS洗3次
(2)将盖玻片浸入95%的酒精固定15分钟
(3)PBS洗2次,每次1分钟
(4)浸入苏木素染液,染色5分钟
(5)自来水浸洗
(6)浸入稀盐酸酒精进行分色,数秒
(7)自来水浸洗
(8)浸入淡氨水中,使胞核蓝化,3分钟
(9)自来水浸洗
(10)浸入伊红染液,染色5分钟
(11)自来水浸洗
(12)依次经过75%、85%、95%酒精各1次,95%酒精1次和100%酒精2次逐级脱水,每次3分钟。
(13)1:1无水乙醇+二甲苯,3分钟
(14)通过二甲苯2次,每次3分钟
最后滴上中性树胶,将有细胞的一面向下固定于载玻片上。
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漂_浮

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
伊红没染上,从方案来看伊红染色时间够长了,建议检查伊红是否过期
2楼2014-10-12 22:38:22
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z631535213

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

去年做过个把月的巴士染色,中间也出现过这样视野内全都蓝染,当时我这分析是苏木素染色时间长了,我这缩短苏木素的染色时间问题就解决了   不过整套染色过程和你的有点不一样
3楼2015-03-04 10:23:41
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