应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 用HPLC监控紫杉醇的DMSO溶液浓度会不会随时间变化，应该用峰面积还是峰高作参考？
51/1返回列表
查看: 2591  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 用HPLC监控紫杉醇的DMSO溶液浓度会不会随时间变化，应该用峰面积还是峰高作参考？ 已有7人参与

实验需要用的紫杉醇DMSO溶液，每次实验时稀释使用，为了保证溶液质量，每次使用时用HPLC检测紫杉醇浓度。
查了文献后决定条件定为
56微克/毫升的溶液进样5微升;
1毫升每分钟，乙腈/水=35/65;
25-40度不控制温度;
检测器227纳米。
文献里10分钟以后出峰，我做的2.6分钟出峰，峰高接近3000，面积5.7*e4。连续进了三次样，结果一致性很好。
紧接着没有平衡就换成乙腈/水=25/75（好久不做液相了，为了让他晚点儿出峰竟然。。。）进样一次，2.6分钟出峰，峰高接近3000，面积4.0*e4。
。。。。。。。。。。。。
过了一星期多，用乙腈/水=35/65，2.6分钟出峰，峰高接近3000，面积4.7*e4.
额。。。醉了，不知道怎么判定浓度了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
为爱而生
1楼 2014-10-12 08:38:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-10-12 11:18:11
谢谢！我用的250mm柱子。我前面提到了连续进样四次的，每次都是走了10分钟多，没有出现别的峰。。。也是不能说明这是紫杉醇啊！？

我再试试...

是的，把把运行时间延长一下看看，我看文献在5-25分钟出峰，流动相有用到80比例的
赞一下 回复此楼
归零
7楼2014-10-12 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主好 估计你三次观察到的峰都是溶剂峰，不可能是紫杉醇的峰，在你的条件下出峰时间不会这么早的，除非是UPLC，HPLC一般会控制出峰时间在3分钟以后，我做的一般控制在5分钟左右以后；建议楼主，运行时间延长（柱子短可以走到25分钟试试看，长柱子建议走40分钟以上）试试看，尤其是色谱柱是250mm时，最好用个梯度，最后把乙腈比例调为90%走了看看。
赞一下(3人) 回复此楼
归零
2楼2014-10-12 09:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

klicking

至尊木虫 (著名写手)
补充一个问题，定量肯定使用峰面积，用峰高的很少，峰高要求峰的对称性在0.95 - 1.05之间，这个要求有点高了。
赞一下(1人) 回复此楼
归零
3楼2014-10-12 09:25:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-10-12 11:08:37
建议楼主重新考虑一下流动相配制，前几分钟杂峰比较多，干扰性强，最好出峰时间再向后延迟一些。此外，峰高或峰面积都可以作为标准判断，比如UV依赖于吸光度值等，但是这与物质种类有关，若是峰型好，规则而峰尖，都可以，反之最好选择积分面积比较好一些。（个人看法，仅供参考）
赞一下(1人) 回复此楼
加油！
4楼2014-10-12 09:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 8/400 2026-03-01 09:26 by 好好好1233
[考研] 290求调剂 +6 材料专硕调剂； 2026-02-28 7/350 2026-03-01 09:21 by L135790
[考研] 291分工科求调剂 +5 science饿饿 2026-03-01 5/250 2026-03-01 09:19 by L135790
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 材料类求调剂 +7 wana_kiko 2026-02-28 7/350 2026-03-01 07:55 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭