24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2693  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 用HPLC监控紫杉醇的DMSO溶液浓度会不会随时间变化,应该用峰面积还是峰高作参考? 已有7人参与

实验需要用的紫杉醇DMSO溶液,每次实验时稀释使用,为了保证溶液质量,每次使用时用HPLC检测紫杉醇浓度。
查了文献后决定条件定为
56微克/毫升的溶液进样5微升;
1毫升每分钟,乙腈/水=35/65;
25-40度不控制温度;
检测器227纳米。
文献里10分钟以后出峰,我做的2.6分钟出峰,峰高接近3000,面积5.7*e4。连续进了三次样,结果一致性很好。
紧接着没有平衡就换成乙腈/水=25/75(好久不做液相了,为了让他晚点儿出峰竟然。。。)进样一次,2.6分钟出峰,峰高接近3000,面积4.0*e4。
。。。。。。。。。。。。
过了一星期多,用乙腈/水=35/65,2.6分钟出峰,峰高接近3000,面积4.7*e4.
额。。。醉了,不知道怎么判定浓度了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为爱而生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-10-12 09:53:36
建议楼主重新考虑一下流动相配制,前几分钟杂峰比较多,干扰性强,最好出峰时间再向后延迟一些。此外,峰高或峰面积都可以作为标准判断,比如UV依赖于吸光度值等,但是这与物质种类有关,若是峰型好,规则而峰尖,都 ...

跟我在其他地方看到的说法一样!谢谢。峰型不尖
为爱而生
5楼2014-10-12 11:09:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主好 估计你三次观察到的峰都是溶剂峰,不可能是紫杉醇的峰,在你的条件下出峰时间不会这么早的,除非是UPLC,HPLC一般会控制出峰时间在3分钟以后,我做的一般控制在5分钟左右以后;建议楼主,运行时间延长(柱子短可以走到25分钟试试看,长柱子建议走40分钟以上)试试看,尤其是色谱柱是250mm时,最好用个梯度,最后把乙腈比例调为90%走了看看。
归零
2楼2014-10-12 09:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

klicking

至尊木虫 (著名写手)

补充一个问题,定量肯定使用峰面积,用峰高的很少,峰高要求峰的对称性在0.95 - 1.05之间,这个要求有点高了。
归零
3楼2014-10-12 09:25:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-10-12 11:08:37
建议楼主重新考虑一下流动相配制,前几分钟杂峰比较多,干扰性强,最好出峰时间再向后延迟一些。此外,峰高或峰面积都可以作为标准判断,比如UV依赖于吸光度值等,但是这与物质种类有关,若是峰型好,规则而峰尖,都可以,反之最好选择积分面积比较好一些。(个人看法,仅供参考)
加油!
4楼2014-10-12 09:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +27 Xxjc1107. 2026-04-13 30/1500 2026-04-19 08:22 by cuisz
[考研] 291求调剂 +10 关忆北. 2026-04-14 10/500 2026-04-18 23:32 by 路病情
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 297,工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 295分求调剂 +5 ?要上岸? 2026-04-17 5/250 2026-04-17 16:51 by fenglj492
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 7/350 2026-04-16 14:31 by zhouxiaoyu
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
信息提示
请填处理意见