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DAPI染色出现问题,求帮助
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hao901025
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DAPI染色出现问题,求帮助
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我的DAPI染的是活的未固定的HeLa细胞,之前染得还可以,可以清楚看到核,现在不可以了,附一张图,希望大家可以帮忙找找问题
DAPI染色.jpg
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确定DAPI还好用吗?最近是偶尔一次,还是一直这样呢。
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2014-09-25 22:02:04
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Originally posted by
陌路行客
at 2014-09-25 22:02:04
确定DAPI还好用吗?最近是偶尔一次,还是一直这样呢。
半月前用还好用,最近就这样个样子了,不确定是不是DAPI的问题
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3楼
2014-09-26 08:26:07
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hao901025
at 2014-09-26 08:26:07
半月前用还好用,最近就这样个样子了,不确定是不是DAPI的问题...
细胞的处理和之前有区别吗,比如通透时间,DAPI孵育时间和洗涤时间,
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4楼
2014-09-26 08:50:31
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陌路行客
at 2014-09-26 08:50:31
细胞的处理和之前有区别吗,比如通透时间,DAPI孵育时间和洗涤时间,...
没有,所有处理手段都一样,细胞也是同一个,中间没有复苏过其他,一直在传代的同一细胞,昨天加大染料量处理,还是同样的效果
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5楼
2014-09-26 11:08:55
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很像细胞受伤了,也可能是污染了。
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2014-09-28 18:56:20
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2016-04-01 15:34:05
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hao901025
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8711016923306
at 2016-04-01 15:34:05
楼主你的这个问题解决了吗?我的细胞出现的状况跟你的非常像,也不知道是什么原因,求指教!!!
这个问题解决了,因为我的细胞是在加药之前染色的,然后细胞状态好的时候细胞膜完整,并且对DAPI的通透性不高,后来我过夜染色了,效果就很好看了。但是过夜染色可能对细胞周期有影响,而我的实验只要求膜的完整性,具体还得根据你的实验情况而定。
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8楼
2016-08-29 15:23:18
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hao901025
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7楼
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8711016923306
at 2016-04-01 15:34:05
楼主你的这个问题解决了吗?我的细胞出现的状况跟你的非常像,也不知道是什么原因,求指教!!!
这个问题解决了,因为我的细胞是在加药之前染色的,然后细胞状态好的时候细胞膜完整,并且对DAPI的通透性不高,后来我过夜染色了,效果就很好看了。但是过夜染色可能对细胞周期有影响,而我的实验只要求膜的完整性,具体还得根据你的实验情况而定。
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9楼
2016-08-29 15:26:19
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楼主 请问一下 这种染色需要破膜吗 我的实验需要膜完整 如果我把离心收集到的细胞直接加上DAPI染色 滴到片子上就可以直接观察了吗?
还需要注意什么? 染色的时间要多久呢? 谢谢分享
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10楼
2016-10-06 21:23:45
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