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jesse86

金虫 (小有名气)

[求助] 如何将两段同样的序列进行无缝的串联重复连接? 已有6人参与

RT,该片段本身有110bp左右。
重叠PCR吗?重叠区域要多长呢?有什么要注意的吗?还有其他快捷的方法吗?
谢谢先!
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没什么好写的
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zergbloody

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

合成吧 我也自己做过 虽然成功了 但是你算一下你投入的各种酶 提质粒的成本 培养基的成本 以及最关键的时间的成本 还是合成是最便宜的 因为实验难免会反复 这样成本就高了 老板其实最关心的还是结果 劝楼主不要难为自己 真想自己做可以联系我 我前一段时间连接了4个重复

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-10-07 08:23:52
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查看全部 11 个回答

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jesse86: 金币+1 2014-09-26 13:10:15
我觉得110的片段要串联的话,最快、最好的方法就是直接叫公司合成,还可以一次串联好几个片段!
2楼2014-09-26 12:17:33
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jesse86

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-09-26 12:17:33
我觉得110的片段要串联的话,最快、最好的方法就是直接叫公司合成,还可以一次串联好几个片段!

谢谢 ,我打算先扩一下,实在扩不出来再合成吧,毕竟合成有点小贵
没什么好写的
3楼2014-09-26 13:06:57
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aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jesse86(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-26 19:31:30
jesse86: 金币+1, 谢谢 2014-10-06 11:40:06
overlap pcr,重叠部分一般25bp左右。由于片段较短,可以在载体两端各加一部分一起扩增。
4楼2014-09-26 14:32:58
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