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大饼先生

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有色谱柱的大神啊?!!求助!! 已有6人参与

最近用盐酸胍和TFA结合小核酸,跑了C18的HPLC,样品有点浑浊,然后进样了,杂质在C18上残留了,有没有什么办法洗掉啊?常规的反接色谱柱什么的都试过了,现在由于柱子堵了,压力一直升高,跪求洗脱办法!谢谢~
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revil2010

捐助贵宾 (小有名气)

巴巴拉

引用回帖:
8楼: Originally posted by 大饼先生 at 2014-09-04 09:37:51
过滤的话小核酸以及里面要测的物质就被过滤掉了。。。。唉。。。倒着冲也试过了,用的是乙腈,但是还是不行,另外,又一次流动相不小心走空了,估计处理没完全,里面还含有气泡,下一步我打算用异丙醇冲冲试试看吧 ...

目测都能看到浑浊的话确实不该直接进液相,担心过滤掉太多东西的话,至少应该离心下,至少肉眼澄清才能进液相的。
Getyourway
13楼2014-09-04 11:18:01
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深圳卓越生物

禁言 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2014-09-03 17:12:44
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
大饼先生(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-09-04 21:55:26
1.下次走的时候一定要滤过,外加保护柱
2.当前的柱子可以5%-10%的甲醇水正冲不行的话,以0.1-0.5ml/min的流速反冲过夜,第二天正接看看能不能用吧,能用的话就接着用,不行再活化一下,实在不行只能丢了
3.可以把柱头的筛网取下清洗
4.如果柱头污染,可以把部分填料抠掉
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
3楼2014-09-03 17:19:52
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
大饼先生(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-09-04 21:55:38
如果什么方法都试了均无效的话,试试异丙醇水溶液吧,异丙醇浓度可以先从5%开始,倒着洗。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
4楼2014-09-03 17:30:20
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