应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助链霉亲和素包被问题！
11/1返回列表
查看: 1117  |  回复: 0
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yanqiwan

捐助贵宾 (初入文坛)

[求助] 求助链霉亲和素包被问题！

各位战友，本人做亲和素包被遇到问题，现将问题描述如下，求各位点拨。非常感激！
技术路线：
第一步：在corning 高吸附酶标板上包被5ug/ml亲和素
第二步：加生物标记DNA
第三步：加蛋白和DNA反应
第四步：加和蛋白反应的his6 HRP抗体

封闭液用的roche 封闭液，之前用索莱宝公司的亲和素包被，整体实验结果较好。后改换成amresco亲和素以及索莱宝新批次的亲和素后，背景值超高，OD绝对值达2.多。
背景值产生条件：
1.技术路线步骤中不加DNA，
2.技术路线步骤中不加蛋白，
3.将亲和素包被，封闭后，直接加HRP标记抗体。

用之前做出结果的亲和素得到的这3种背景值最多不超过0.2.而现在的生物素所得OD值很高。曾将索莱宝亲和素和amresco在同一酶标板操作，前者所得结果正常。请问战友：
1.知不知道哪家的亲和素用于包被背景低？
2.看下我的包被是否有问题？
3.能不能介绍好一些的包被方法。
再次感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-09-02 17:01:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanqiwan 的主题更新
11/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭