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winnerzhi

金虫 (正式写手)

[交流] 关于缓冲液的配制

最近在配醋酸缓冲液和酒石酸缓冲液,网上有各种版本的配制方法,以0.2M,pH4.5醋酸缓冲液为例:
方法一:分别配制0.2M的醋酸和醋酸钠溶液,按比例混合到pH4.5.
方法二:分别配制0.4M的醋酸和醋酸钠溶液,按比例混合到pH4.5
方法三:按照Henderson-Hasselbalch方程,4.5=4.75+lg()算出比例,用蒸馏水稀释。
我们实验室只有去离子水,所以方法三直接让我忽视了,我不知道方法一和方法二哪个是正确的,又是什么原理呢?
还有就是配置缓冲液有没有一种通用的方法,或者说比较公认的方法?
参考帖子:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2834583
                 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4420058
                 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4343676
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那么多的未知构成了美妙的人生
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2楼2014-08-27 16:30:41
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帖航

银虫 (小有名气)

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winnerzhi: 金币+5 2014-08-28 10:24:38
配成0.2M再混合,缓冲液的浓度指的是共轭酸碱对的混合浓度,不是其中一种的浓度,大部分生物化学实验指导书上都有配方的。Henderson-Hasselbalch方程是无机化学学的,你可以用它先算出共轭酸碱对的浓度比值,在用上和为0.2M就能算出来了。还有一般意义上的去离子水要比蒸馏水好,去离子水是通过膜过滤系统得到的(反渗透),蒸馏不用我说,不管蒸馏多少次,是无法完全去除水中的离子的。不过实验室用这两种水没有分得很细。
3楼2014-08-28 09:56:46
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帖航

银虫 (小有名气)


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引用回帖:
2楼: Originally posted by tuoxian at 2014-08-27 16:30:41

这是书上的配方,你看看
关于缓冲液的配制
未命名.jpg

4楼2014-08-28 10:06:28
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winnerzhi

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 帖航 at 2014-08-28 09:56:46
配成0.2M再混合,缓冲液的浓度指的是共轭酸碱对的混合浓度,不是其中一种的浓度,大部分生物化学实验指导书上都有配方的。Henderson-Hasselbalch方程是无机化学学的,你可以用它先算出共轭酸碱对的浓度比值,在用上 ...

好像去离子水的pH和蒸馏水的pH不同吧,去离子水好像是偏酸性的,蒸馏水是中性的,如果按照计算的方法用来配缓冲液是不是会影响pH?我自己试过,配出来的缓冲液用pH计测pH要比目标pH低,大概0.4左右吧,不知道是不是我pH计的问题,因为设备比较老了
那么多的未知构成了美妙的人生
5楼2014-08-28 10:24:16
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帖航

银虫 (小有名气)

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winnerzhi: 金币+5 2014-08-28 12:28:05
引用回帖:
5楼: Originally posted by winnerzhi at 2014-08-28 10:24:16
好像去离子水的pH和蒸馏水的pH不同吧,去离子水好像是偏酸性的,蒸馏水是中性的,如果按照计算的方法用来配缓冲液是不是会影响pH?我自己试过,配出来的缓冲液用pH计测pH要比目标pH低,大概0.4左右吧,不知道是不是 ...

去离子水和蒸馏水都应该呈中性,pH偏差有很多原因,水源处理不彻底,你配置缓冲液时引入的系统误差和随机误差,等等原因,如果pH有偏差,直接用你的共轭酸碱调,没有问题。
6楼2014-08-28 11:20:01
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