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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于刚果红染色的问题，求助！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

[求助] 关于刚果红染色的问题，求助！！！！！！！！！！！！！！！！！！！ 已有1人参与

小弟最近做一个纤维素水解酶的底物活性染色，实验方案是先用蛋白（不变性）跑SDS-PAGE，然后用醋酸缓冲液（pH=5）洗掉胶上的SDS，后将胶放入1%CMC（醋酸缓冲液配）底物中60度孵育一小时，让酶水解CMC，拿出胶，放入0.1%刚果红中染色半小时，用1M NaCL脱色。
理论上酶在胶条的位置应该有透明圈，但是我做了几次，那个位置基本都是偏黑或者蓝色，只有偶然一次有透明圈，但是重复不出来。
注：A：实验中发现，我将胶条从60度的cmc拿出来，放入刚果红时，刚果红立刻变为墨蓝色。
       B：染色后从刚果红中拿出来，整个胶全为红色，蛋白处无法看到任何变化。
       C：NaCl洗脱一晚后，蛋白位置变为蓝色或者黑色。
如下图：

关于刚果红染色的问题，求助！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
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关于刚果红染色的问题，求助！！！！！！！！！！！！！！！！！！！-1
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1楼 2014-08-24 10:00:01
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1405981468a

新虫 (初入文坛)
你这个活性电泳后来做出来了吗？我现在也想做一个这样的实验但是不知打怎么做，不知道是否可以帮帮我
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2楼2015-06-21 10:40:06
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李志红

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问楼主这个刚果红染色液是怎么配的，用蒸馏水还是乙醇
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3楼2015-09-13 16:31:06
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