| 查看: 2786 | 回复: 2 | ||
shuangzi8761银虫 (著名写手)
|
[求助]
关于刚果红染色的问题，求助！！！！！！！！！！！！！！！！！！！ 已有1人参与
|
|
小弟最近做一个纤维素水解酶的底物活性染色，实验方案是先用蛋白（不变性）跑SDS-PAGE，然后用醋酸缓冲液（pH=5）洗掉胶上的SDS，后将胶放入1%CMC（醋酸缓冲液配）底物中60度孵育一小时，让酶水解CMC，拿出胶，放入0.1%刚果红中染色半小时，用1M NaCL脱色。 理论上酶在胶条的位置应该有透明圈，但是我做了几次，那个位置基本都是偏黑或者蓝色，只有偶然一次有透明圈，但是重复不出来。 注：A：实验中发现，我将胶条从60度的cmc拿出来，放入刚果红时，刚果红立刻变为墨蓝色。 B：染色后从刚果红中拿出来，整个胶全为红色，蛋白处无法看到任何变化。 C：NaCl洗脱一晚后，蛋白位置变为蓝色或者黑色。 如下图：  $JD)0}N{KGLV5%RPCXZ4UX8.png  7V70M2N_ID9SCZ%MBBV6(B6.png |
回复此楼» 猜你喜欢
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有80人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 孢子预萌发培养基
已经有13人回复
- 纤维素直径的测定
已经有8人回复
- native-page活性染色
已经有13人回复
- 关于TEM染色的问题
已经有15人回复
- 求助染色样品的光学显微镜表征
已经有4人回复
- 请问放线菌如何让染色
已经有12人回复
- 纤维素分解菌，望高人指教
已经有17人回复
- 使用刚果红染色法测纤维素酶活
已经有5人回复
- Visual MinTeq谁会用啊，主要是说明什么问题，要输入几种离子怎么输入
已经有25人回复
- 求助啊求助，关于trypan blue台盼蓝染色的问题！！！
已经有9人回复
- 求助，PLGA微球的TEM染色问题
已经有10人回复
- 求助：真菌常用的染色法
已经有6人回复
- 求助DGGE染色问题
已经有20人回复
- 【求助】高分子胶束TEM负染色的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】立春红 WB 染色
已经有11人回复
- 【求助】关于铝合金阳极染色时，吸附染料问题！
已经有6人回复
- 【求助/交流】请问霉菌怎么点种？（刚果红染色）
已经有8人回复
- 【讨论】看不懂一副H&E染色的图，求助
已经有4人回复
1405981468a
新虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 10.9
- 散金: 5
- 帖子: 33
- 在线: 11.7小时
- 虫号: 2638031
- 注册: 2013-09-05
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2015-06-21 10:40:06
3楼2015-09-13 16:31:06
200