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琼忻慕玉

铜虫 (初入文坛)

[求助] Lowry测定蛋白质含量 已有1人参与

Lowry法测定蛋白质含量,用牛血清白蛋白做标准曲线时,加了Floin-酚甲试剂时怎么没有显紫红色???加完Floin-酚乙试剂,室温放置30min后测定溶液的吸光度,发现吸光度很乱,平行样之间也有很大的误差;之前我做光谱扫描,该溶液吸收峰不明显,是很大一个吸收范围,这是为什么?
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芯微蓝

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-23 17:21:44
楼主你好,我没有做过Folin---酚法测定蛋白质含量,所以不是很清楚你的甲液乙液是自己配置的还是买的试剂盒中的标品。
1、如果是试剂盒做的话,看一下说明书上要求放置多长时间测定吸光度。2、平行样之间有差异除了样品本身的差异外也要考虑操作时产生的误差。3、如果不能确定具体吸收波长,做一个全波段扫描,如果是大范围不能确定的话,去查一下相关文献,看做过这个实验的人选用的波长。
我个人用的是考马斯亮蓝法测蛋白质含量,在酶标板上点样,用酶标仪测定的。楼主也可以考虑一下这个方法。
2楼2014-08-22 17:10:10
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琼忻慕玉

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 芯微蓝 at 2014-08-22 17:10:10
楼主你好,我没有做过Folin---酚法测定蛋白质含量,所以不是很清楚你的甲液乙液是自己配置的还是买的试剂盒中的标品。
1、如果是试剂盒做的话,看一下说明书上要求放置多长时间测定吸光度。2、平行样之间有差异除了 ...

谢谢,我是自己配的甲液乙液,今天重做了一遍,结果还行
3楼2014-08-23 16:19:31
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