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fower9

铜虫 (小有名气)

[求助] 中药提取中的问题,拜托拜托 已有4人参与

我在做中药总皂苷的提取,制成类似药典上人参总皂苷的提取物,并进行质量控制研究,现在遇到一些问题,希望大家赐教。
一、我初步想醇提后过大孔吸附树脂得总提取物,在测定提取物中皂苷含量时,分别直接选用香草醛-高氯酸法紫外测定和用正丁醇萃取后再用紫外测定,但结果含量不同,萃取后测定结果较前者偏低,我想知道造成这种结果的原因是什么,是因为显色专属性差还是因为萃取过程中有效成分造成了损失,在今后含量测定时我是否需要萃取后再测定。
二、当我优选提取工艺时,以总皂苷含量作为评价标准,每次提取后是直接显色测定含量,还是提取后过大孔吸附树脂后再测定,还是提取后过大孔吸附树脂后萃取后再测定。这个问题跟第一个有些重复。
三、每次测定皂苷含量时需要重新做标准曲线吗,因为我每次做标曲时,在测定波长和标准品浓度不变的情况下,所得吸光度值存在较大的差异。


我本科是药学,对这方面了解少,又缺乏实验思路,恳请各位大神帮忙解答,金币不多,不甚感激!
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好好做实验
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lovedich

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-23 11:34:08
fower9: 金币+10 2014-08-23 13:49:45
可以很负责的告诉你标准曲线必须每次都做,可以粗提取加饱和正丁醇提取,然后再大孔树脂,先用水洗脱,弃去,然后再用50%~80%醇洗脱,收集即为总皂苷,做紫外,尽量除去杂质干扰
5楼2014-08-22 19:50:41
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070918

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2014-08-23 11:33:57
fower9: 金币+10 2014-08-23 13:49:12
估计是显色的专属性不强,一般用正丁醇萃取后的总皂苷的含量会高一些,还有就是可以选择一个指标性成分进行含量测定,那样误差会少一些;也可以用含量测定的方法验证一下你萃取前后的含量,看是什么原因造成紫外外检测的差异;
我觉得是没有必要每次都重新做标准曲线
天道酬勤
2楼2014-08-22 13:34:14
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jytryh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2014-08-23 11:34:02
fower9: 金币+10 2014-08-23 13:49:30
萃取后测定结果较前者偏低,是指皂苷总量还是测定值,如是皂苷总量,造成这种结果的原因是萃取过程造成的损失,但纯度一定会增高,如果损失不大这是正常的。粗提取,粗提取+大孔,粗提取+大孔+萃取,选择哪种测定这取决于你需要产品的纯度。每次测定皂苷含量时需要重新做标准曲线。
中医药是中华民族一颗璀璨的明珠
3楼2014-08-22 14:35:39
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fower9

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jytryh at 2014-08-22 14:35:39
萃取后测定结果较前者偏低,是指皂苷总量还是测定值,如是皂苷总量,造成这种结果的原因是萃取过程造成的损失,但纯度一定会增高,如果损失不大这是正常的。粗提取,粗提取+大孔,粗提取+大孔+萃取,选择哪种测定这 ...

那请问如果已经确定提取方法是粗提+大孔了,那我在含量测定时,需要再萃取吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
好好做实验
4楼2014-08-22 15:03:56
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