| 查看: 3753 | 回复: 22 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
sakura01_22木虫 (小有名气)
|
[求助]
蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出
|
||||
| 如题，在蛋白质相互作用研究中，IP检测，蛋白A能拉下蛋白B，但是蛋白B IP蛋白A时，检测不出。重复3遍左右，依然检测不出，希望哪位虫友能帮忙解答一下。是否存在相互作用只能单方面pull-down的情况，这种情况如何解释？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 分子生物实验及蛋白纯化结晶相关链接 | 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有186人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质电泳跑不出条带怎么办？？？？急急急！！！！
已经有4人回复
- 请问畜禽血液应该怎样保存，不是要检测生化指标，就是酶解蛋白质
已经有4人回复
- 蛋白质消解——一直消解不出来 求大神解救~~
已经有5人回复
- 蛋白质之间相互作用的研究方法有哪些？
已经有3人回复
- 蛋白质二级结构预测
已经有9人回复
- 【求助】求解释：荧光光谱法研究变性剂对蛋白质构象影响，峰强变而峰位不发生变化的可
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教高人：GST-pull down找出B蛋白和A蛋白相互作用，下游实验要怎么做啊
已经有4人回复
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
10楼2014-08-19 02:01:11
dingchaoyue
木虫 (著名写手)
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 783.2
- 散金: 112
- 红花: 5
- 帖子: 1484
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1918337
- 注册: 2012-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
2楼2014-08-17 11:48:47
ssssllllnnnn 
至尊木虫 (知名作家)
Translator and Proofreader
- 应助: 452 (硕士)
- 金币: 31580.9
- 红花: 100
- 帖子: 7681
- 在线: 19966.6小时
- 虫号: 3328089
- 注册: 2014-07-17
- 专业: 肿瘤发生
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sakura01_22(西门吹雪170代发): 金币+4, 鼓励回帖交流 2014-08-17 20:28:38
sakura01_22: 金币+2 2014-08-19 10:34:54
感谢参与，应助指数 +1
sakura01_22(西门吹雪170代发): 金币+4, 鼓励回帖交流 2014-08-17 20:28:38
sakura01_22: 金币+2 2014-08-19 10:34:54
|
这种情况虽然少见，但却是可以出现的。具体到你的情况： 1、确证用A之抗体Co-IP B的真实性，具体说要有对照（同种属的control IgG对照）。 2、另选一种或几种B的抗体试一试。许多抗体并非适于IP实验，这时只能另选可能用的其他抗体。 3、用其他方法验证A-B间的相互作用（physical interaction），如GST pulldown assays等。 4、可以用mammalian two-hybrid assay在功能上（functional interaction）研究A-B间的相互作用。 Good luck！ |
3楼2014-08-17 12:11:30
sakura01_22
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3212.7
- 散金: 28
- 红花: 5
- 帖子: 256
- 在线: 126.5小时
- 虫号: 971268
- 注册: 2010-03-15
- 性别: MM
- 专业: 抗肿瘤药物药理
4楼2014-08-18 16:50:35
