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sakura01_22

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出

如题,在蛋白质相互作用研究中,IP检测,蛋白A能拉下蛋白B,但是蛋白B IP蛋白A时,检测不出。重复3遍左右,依然检测不出,希望哪位虫友能帮忙解答一下。是否存在相互作用只能单方面pull-down的情况,这种情况如何解释?
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dingchaoyue

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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sakura01_22(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-17 20:28:26
sakura01_22: 金币+2 2014-08-19 10:34:46
可否用pull-down的方法严重一下b是否可以拉下a?你的那种情况我们组里面有人也出现过那种情况,后来用纯化蛋白用pull down方法解决的,而不是用抗体。当然,还有可能那两蛋白不互作,有a拉b的假阳性。
蛋白互作能否用bifc方法来试试?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-17 11:48:47
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dingchaoyue

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sakura01_22 at 2014-08-18 16:50:35
GST-pull down和BIFC摸索起来都挺费时间的,我本来想用体内试验证明一下二者有相互作用,谁知道出现这种诡异的情况,anyway,谢谢亲的回复!...

呵呵,不用谢。
good luck。

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-08-18 22:28:53
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