[求助] 蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出

2楼: Originally posted by dingchaoyue at 2014-08-17 11:48:47
可否用pull-down的方法严重一下b是否可以拉下a？你的那种情况我们组里面有人也出现过那种情况，后来用纯化蛋白用pull down方法解决的，而不是用抗体。当然，还有可能那两蛋白不互作，有a拉b的假阳性。
蛋白互作能否 ...

3楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-17 12:11:30
这种情况虽然少见，但却是可以出现的。具体到你的情况：
1、确证用A之抗体Co-IP B的真实性，具体说要有对照（同种属的control IgG对照）。
2、另选一种或几种B的抗体试一试。许多抗体并非适于IP实验，这时只能另选 ...

6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-08-18 18:42:31
抗体是否合适是个问题，还有2种蛋白的比例。比如2个A就有1个结合B，但是100个B中只有5个结合A。
顺便说一下你这个不叫pull-down。

10楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 02:01:11
任何一种实验技术都有系统误差和局限性，很多时候，我们无法去具体解决为什么会如此，但是如果有条件能够深入一些讨论，还是会有不一样的收获。楼主的问题挺有价值！值得讨论！