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sakura01_22木虫 (小有名气)
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[求助]
蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出
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| 如题，在蛋白质相互作用研究中，IP检测，蛋白A能拉下蛋白B，但是蛋白B IP蛋白A时，检测不出。重复3遍左右，依然检测不出，希望哪位虫友能帮忙解答一下。是否存在相互作用只能单方面pull-down的情况，这种情况如何解释？ |
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【答案】应助回帖
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sakura01_22(西门吹雪170代发): 金币+4, 鼓励回帖交流 2014-08-17 20:28:38
sakura01_22: 金币+2 2014-08-19 10:34:54
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sakura01_22(西门吹雪170代发): 金币+4, 鼓励回帖交流 2014-08-17 20:28:38
sakura01_22: 金币+2 2014-08-19 10:34:54
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这种情况虽然少见，但却是可以出现的。具体到你的情况： 1、确证用A之抗体Co-IP B的真实性，具体说要有对照（同种属的control IgG对照）。 2、另选一种或几种B的抗体试一试。许多抗体并非适于IP实验，这时只能另选可能用的其他抗体。 3、用其他方法验证A-B间的相互作用（physical interaction），如GST pulldown assays等。 4、可以用mammalian two-hybrid assay在功能上（functional interaction）研究A-B间的相互作用。 Good luck！ |
3楼2014-08-17 12:11:30
dingchaoyue
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2楼2014-08-17 11:48:47
sakura01_22
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4楼2014-08-18 16:50:35
sakura01_22
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5楼2014-08-18 17:00:22