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扩出的目的带，自己跑电泳 很亮，测序时为什么总说 浓度低，取消。。 已有6人参与
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请教各位大侠： 我扩的基因片段，自己跑了电泳，目的条带比maker亮，送测后，说 浓度低，取消测序，于是自己将之前预留的其中一管样自己再跑电泳看，目的条带还是比较亮；于是再扩，送7个样，仅1个出来了，其他结果还是如前；第三次扩了后，说 信号弱，无信号，无条带取消。。 请教大侠，这是哪里出了问题，浓度低、信号弱、无信号、无条带取消。。分别说明不同的问题还是同一问题呀？请问该如何解决呀？ 不胜感激！ |
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ncuduhan
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for5
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2楼2014-08-10 09:33:12
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
fckgood(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:29:46
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你是不是回收连接质粒载体送去测序的啊？ 如果是这样子，那就有多个环节问题： 1 是不是回收出现了问题，你用的试剂盒回收的吗？可以在洗脱的时候洗脱两次，这样可以增加回收效率 2 连接质粒载体，不知道你用的是什么载体，不过我一般用T-easy，所以你要考虑连接载体上的环节 3 抽提质粒，不知道你用的什么方法，是试剂盒还是sol I II III，抽了质粒你可以先酶切自己验证一下 4 我觉得一般情况下，送去测序的路途上应该没有什么问题 |
3楼2014-08-10 09:48:48
zhaodahe
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4楼2014-08-10 09:55:53
40