24小时热门版块排行榜    

查看: 1958  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fckgood

新虫 (初入文坛)

[求助] 扩出的目的带,自己跑电泳 很亮,测序时为什么总说 浓度低,取消。。 已有6人参与

请教各位大侠:
       我扩的基因片段,自己跑了电泳,目的条带比maker亮,送测后,说 浓度低,取消测序,于是自己将之前预留的其中一管样自己再跑电泳看,目的条带还是比较亮;于是再扩,送7个样,仅1个出来了,其他结果还是如前;第三次扩了后,说 信号弱,无信号,无条带取消。。    请教大侠,这是哪里出了问题,浓度低、信号弱、无信号、无条带取消。。分别说明不同的问题还是同一问题呀?请问该如何解决呀?  不胜感激!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fckgood(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:29:46
你是不是回收连接质粒载体送去测序的啊?
如果是这样子,那就有多个环节问题:
1 是不是回收出现了问题,你用的试剂盒回收的吗?可以在洗脱的时候洗脱两次,这样可以增加回收效率
2 连接质粒载体,不知道你用的是什么载体,不过我一般用T-easy,所以你要考虑连接载体上的环节
3 抽提质粒,不知道你用的什么方法,是试剂盒还是sol I II III,抽了质粒你可以先酶切自己验证一下
4 我觉得一般情况下,送去测序的路途上应该没有什么问题
3楼2014-08-10 09:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:29:29
基本是同一问题。夏天的话可能质粒会在运输途中降解。另外你提了质粒,但是可能是假阳性。可以自己酶切鉴定好去测序,亦或者自己送引物
操蛋的XX
2楼2014-08-10 09:33:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我遇到这种情况就换测序公司了,别纠结了…

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-08-10 09:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主,您好,提取完DNA之后做个浓度的测定就可以说明是谁的问题了。
坚持到底就是胜利!
5楼2014-08-10 10:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:35 by bingxueer79
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +6 慕寒mio 2026-03-16 6/300 2026-03-18 14:26 by 007_lilei
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
请填处理意见