应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR求指点
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
861/9返回列表123456下一页末页
查看: 4187  |  回复: 85
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Phoebe.Lee

金虫 (小有名气)

。。。

[求助] PCR求指点 已有35人参与

自己设计的引物扩增基因编码区序列
上游引物:  CCGGAATTC ATGGCCGCGCAGCTGCTGGAGG                 
下游引物：CGCGTCGA CTCAGCTGAGCACCTCTTCCTGGGGC      
加了酶切位点和保护碱基   
引物合成订单给出的tm值分别为65.9和67.8（Tm (50mM Na+) )

做了温度梯度56-64
反应条件：35个循环  Takara  Taq酶   目的片段1600左右
                  94       5min
                  94        30s
                  56-64   30s
                  72        2min
                  72        10min
PCR跑胶结果如图，求大神指点

PCR求指点
jiaotu.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢
岁月静好
1楼 2014-08-04 17:03:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冉兆星

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Phoebe.Lee(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-08 09:29:04
从Marker上看，在1600bp隐隐约约有条带，如果引物的特异性没有问题的话，你把退火温度提高到66-67℃试试，祝好！
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2014-08-04 20:33:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

pzx1004
★
Phoebe.Lee(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-04 17:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

12305045
3楼2014-08-04 17:29:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chyzm

铁杆木虫 (职业作家)
祝福你
4楼2014-08-04 17:43:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chyzm

铁杆木虫 (职业作家)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-08-04 19:41:04
我不太懂，不是说回复就有金币么？
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-04 17:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aabuzhangjun

新虫 (知名作家)
祝福，祈福，愿楼主今后一切顺利，愿自己及女朋友工作顺利，祈福！
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-04 17:54:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tzynew
7楼2014-08-04 17:58:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaoyao145
8楼2014-08-04 18:14:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

假大空
9楼2014-08-04 18:42:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Phoebe.Lee 的主题更新
861/9返回列表123456下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 324求调剂 +7 想上学求调 2026-04-02 7/350 2026-04-02 17:28 by zzsw+
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 化学308分调剂 +14 你好明天你好 2026-03-30 15/750 2026-04-02 13:39 by 嘻嘻笑22
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +9 双马尾痞老板2 2026-04-01 9/450 2026-04-02 12:14 by oooqiao
[考研] 085900土木水利336分求调剂 +4 Zhangjiangj 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:40 by 1753564080
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +7 Ong3 2026-03-27 7/350 2026-04-02 11:29 by 3041
[考研] 261求B区调剂 +5 明仔· 2026-04-01 7/350 2026-04-02 11:17 by 邹尉尉
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +4 redcom 2026-04-01 4/200 2026-04-02 10:16 by wqy8563
[考研] 311求调剂 +16 zchqwer 2026-04-01 18/900 2026-04-02 10:15 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 275求调剂 +12 waltzh 2026-04-01 12/600 2026-04-01 21:44 by chyhaha
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600，349 +9 吃的不少 2026-03-30 9/450 2026-04-01 11:24 by wangjy2002
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 英一数一总分334求调剂 +4 陈阳坤 2026-03-31 4/200 2026-03-31 14:22 by 记事本2026
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +5 加一一九 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:39 by zhshch
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭