24小时热门版块排行榜    

查看: 3896  |  回复: 85

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

你的引物光是特异性区域的Tm就在70℃左右,提高退火温度。
81楼2014-08-11 16:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
82楼2014-08-11 16:44:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
83楼2014-08-12 03:07:45
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

Phoebe.Lee

金虫 (小有名气)

。。。

引用回帖:
83楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-12 03:07:45
根据你引物的tm值,退火温度设定60度理论上应该可以p出,不用设梯度。你是什么marker?要扩增多大的片断呢?应该2000以内的。

2000的marker 扩1600的片段
岁月静好
84楼2014-08-12 12:15:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
85楼2014-08-12 13:38:19
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

Phoebe.Lee

金虫 (小有名气)

。。。

引用回帖:
85楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-12 13:38:19
你的重组质粒鉴定过没有?做菌落pcr了吗?要确保目的片段已经连入了载体。还有就是质粒的浓度多少?一般以质粒为模板很好p的 。

我是用从别人cDNA文库要的目的基因的质粒,浓度20ng/ul
岁月静好
86楼2014-08-12 14:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Phoebe.Lee 的主题更新
信息提示
请填处理意见