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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 求助：β-catenin的免疫荧光做不出来！！！
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sdwfpzf

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：β-catenin的免疫荧光做不出来！！！

紧急求助：小弟最近做β-catenin的免疫荧光，做不出来！！！快疯了！！！具体情况如下：
1、用的DF-1细胞，一种鸡胚成纤维细胞；尝试过sp20细胞，也做不出来。
2、固定液用的丙酮和乙醇（3:2）
3、triton x-100是否添加都尝试过。
4、一抗浓度1:100,1:200,1:500都尝试过；作用时间4℃过夜和37℃1h均用过。
5、一抗浓度1:100,1:200,1:500都尝试过；37℃1或2h均尝试过。（另二抗质量没问题，别的同学用的不错）
一抗是买的santa cruz，难道是一抗原因？
β-catenin是膜蛋白，跟我实验流程有关系？
请各位大侠支招！在此谢过！
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1楼 2014-07-17 19:49:32
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yangyang6868

铁虫 (初入文坛)
★ ★
youlinglyw: 金币+2 2014-07-19 09:20:30
试试甲醇固定。
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2楼2014-07-17 21:49:21
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
★ ★
youlinglyw: 金币+2 2014-07-19 09:20:20
我用过beta－catenin的抗体是来自BD Transduction Laboratories，未曾用过Santa Cruz的抗体。另外我只做Western blot，未试过immune staining.....
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3楼2014-07-17 22:12:44
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sdwfpzf

新虫 (初入文坛)
★ ★
youlinglyw: 金币+2 2014-07-19 09:20:08
跟santa公司沟通，那边让用甲醛固定+抗原修复+封闭后再尝试一次。。。
郁闷！
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-19 08:19:25
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sdwfpzf

新虫 (初入文坛)
自己顶，求关注
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5楼2014-07-22 18:36:35
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