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myllemail

新虫 (小有名气)


[交流] 线粒体提取问题

目前正在做有关线粒体RCR的实验,实验室目前这方面经验不足,所以遇到了很多问题,我这边需要提取动物肌肉中线粒体,买的试剂盒进行研磨提取,不知道各位同仁提出了线粒体以后是如何测得的蛋白浓度?具体浓度大概是多少,我这边得率很低,根本达不到实验要求,搜了很多资料未解,联系了很多论坛里有经验的前辈,但是可能是不太上论坛了所以得到的回复非常有限,希望各位能不吝援手,共同探讨!
期待回帖!
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myllemail

新虫 (小有名气)


自己顶下,大家快来冒个泡啊
2楼2014-07-12 09:01:52
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myllemail

新虫 (小有名气)


为啥没人来呀~~~
3楼2014-07-12 18:27:50
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南海所老龚

新虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
youlinglyw: 金币+1 2014-07-13 17:52:07
如果不是专门提取线粒体的试剂盒,得率是很低的,但是这些量做普通的PCR足够了。我们10u的体系加0.5uDNA就够。祝好!
4楼2014-07-13 10:24:44
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myllemail

新虫 (小有名气)


内容已删除
5楼2014-07-13 10:45:23
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myllemail

新虫 (小有名气)


我猜到了有人会因为金币回帖,没猜到是这样的回帖
11楼2014-07-15 09:40:44
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未婚

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
浓度粗测总超微量紫外可以的吧

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-07-16 02:31:15
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myllemail

新虫 (小有名气)


引用回帖:
12楼: Originally posted by 未婚 at 2014-07-16 02:31:15
浓度粗测总超微量紫外可以的吧

我这边目前是直接测的蛋白浓度,就是感觉得率比较低,想知道其他同仁提取的线粒体浓度是多少,用来参考。呵呵

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13楼2014-07-16 15:46:07
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菁JOJO

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by myllemail at 2014-07-16 15:46:07
我这边目前是直接测的蛋白浓度,就是感觉得率比较低,想知道其他同仁提取的线粒体浓度是多少,用来参考。呵呵...

请教!!!!你是测定蛋白浓度来估算线粒体浓度的么??
效果怎么样呢??
我现在也在做线粒体求赐教!!!!
14楼2015-06-24 17:31:27
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myllemail

新虫 (小有名气)


引用回帖:
14楼: Originally posted by 菁JOJO at 2015-06-24 17:31:27
请教!!!!你是测定蛋白浓度来估算线粒体浓度的么??
效果怎么样呢??
我现在也在做线粒体求赐教!!!!...

是的,你提取线粒体做什么呢?
15楼2015-06-30 14:12:54
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们做的蛋白     thermo的试剂盒   提的细胞量不太大   浓度也不太大。有做线粒体损伤的    看看他们怎么提的吧
16楼2015-07-04 22:56:10
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陈陈陈123

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by myllemail at 2015-06-30 14:12:54
是的,你提取线粒体做什么呢?...

想请教一下,如果我想测定组织样本中线粒体酶活性,需要先买试剂盒提取线粒体么?
17楼2015-11-27 16:11:50
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简单回复
dmbb6楼
2014-07-14 19:31   回复  
myllemail(金币+1): 谢谢参与
tzynew7楼
2014-07-14 19:41   回复  
myllemail(金币+1): 谢谢参与
zimoruyan8楼
2014-07-14 19:47   回复  
myllemail(金币+1): 谢谢参与
假大空9楼
2014-07-14 19:53   回复  
myllemail(金币+1): 谢谢参与
64651058010楼
2014-07-14 20:09   回复  
myllemail(金币+1): 谢谢参与
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