24小时热门版块排行榜    

查看: 1118  |  回复: 5

花葬夏祭

新虫 (初入文坛)

[求助] 氨基化的玻璃与ssDNA作用后,与另一条互补ssDNA作用下不来 已有1人参与

本人学化学的,所以对生物的东西不是很了解
实验情况如下:
1.将玻璃氨基化
2.氨基化的玻璃与ssDNA在Tris-Buffer中(20 mM Tris+37.5 mM MgCL2,用HC调节到7.5)于37℃下反应30min,表征证明该ssDNA上去了
3.与另一条互补的ssDNA链作用,希望能够把前一条ssDNA拉下来
第一条cap   ssDNA:    5'-AAT GCT AGC TAA TCA ATC GGG3'
第二条Target ssDNA:5'-CCC GAT TGA TTA GCA AGC ATT-3‘
问题:
第三步,通过互补作用并不能让ssDNA杂交,难道在非均相的DNA杂交对于温度的要求很高吗?(查阅文献知道最适的杂交温度=Tm-15)
求大神指导~~太痛苦了~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花葬夏祭

新虫 (初入文坛)

没人回到吗~
2楼2014-07-07 17:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花葬夏祭

新虫 (初入文坛)

求大神
3楼2014-07-09 12:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuntcren

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-07-23 22:04:10
花葬夏祭(likedong1021代发): 金币+5, 感谢回帖交流! 2014-10-11 18:04:36
两个互补短单链杂交室温就可以,不需要到最适杂交温度。温度越低氢键越稳定,最适杂交温度比半解链温度低些是为了防止互补性不是那么强的非特异杂交。你这个短链室温就可以。
4楼2014-07-14 16:08:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花葬夏祭

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuntcren at 2014-07-14 16:08:49
两个互补短单链杂交室温就可以,不需要到最适杂交温度。温度越低氢键越稳定,最适杂交温度比半解链温度低些是为了防止互补性不是那么强的非特异杂交。你这个短链室温就可以。

那这个反应对buffer有什么要求吗,什么na离子,mg离子,EDTA什么的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-07-17 09:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuntcren

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 花葬夏祭 at 2014-07-17 09:52:20
那这个反应对buffer有什么要求吗,什么na离子,mg离子,EDTA什么的
...

要,就拿PCRbuffer好了
6楼2014-07-22 12:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 花葬夏祭 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 9/450 2026-08-21 15:38 by dcqxinyang
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 18/900 2026-08-21 11:53 by wuchongjun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见