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氨基化的玻璃与ssDNA作用后,与另一条互补ssDNA作用下不来 已有1人参与
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本人学化学的,所以对生物的东西不是很了解 实验情况如下: 1.将玻璃氨基化 2.氨基化的玻璃与ssDNA在Tris-Buffer中(20 mM Tris+37.5 mM MgCL2,用HC调节到7.5)于37℃下反应30min,表征证明该ssDNA上去了 3.与另一条互补的ssDNA链作用,希望能够把前一条ssDNA拉下来 第一条cap ssDNA: 5'-AAT GCT AGC TAA TCA ATC GGG3' 第二条Target ssDNA:5'-CCC GAT TGA TTA GCA AGC ATT-3‘ 问题: 第三步,通过互补作用并不能让ssDNA杂交,难道在非均相的DNA杂交对于温度的要求很高吗?(查阅文献知道最适的杂交温度=Tm-15) 求大神指导~~太痛苦了~ |
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