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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 关于一抗是HRP标记的，二抗也是，对结果有什么影响？
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)

[交流] 关于一抗是HRP标记的，二抗也是，对结果有什么影响？

我包被的A抗原，用标记的B-HRP抗体检测，现在有一个anti-B-HRP。这样检测与正常的直接法B-HRP检A抗原有什么影响呢？显色的时候B-HRP上的HRP会被显色吗？
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1楼 2014-07-03 11:57:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
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实际上就是被要检测的抗原共价连接上了一个酶，如果没有引起大的蛋白质折叠的改变和抗原表位的空间位阻，应该可以使得原来识别抗原的抗体在此识别抗原。因为细胞外的共价连接一般不会引起重折叠，除非反应条件剧烈，使得蛋白质变性后又复性，一般不会引起空间抗原表位发生改变。但是被要检测的抗原共价连接上了一个酶仍然能够与原来抗原的抗体结合，并不表示被要检测的抗原共价连接上了一个酶的抗原表位没有发生改变，也可能是被结合的酶的表位发生了改变形成了新的第二抗体的识别位点。
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9楼2014-07-29 09:24:06
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普通回帖

panda73

金虫 (小有名气)
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-08 10:49:01
当然会，既然B已经标记HRP了，为什么还要用抗B-HRP?
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2楼2014-07-03 22:50:28
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-08 10:49:08
反应肯定会反应，但我没看明白楼主为什么要这么做呢？有点画蛇添足。
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3楼2014-07-08 08:40:35
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zhaocunyang

铁虫 (初入文坛)
★
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哎  肯定会有呀 你为什么要用B的抗体去检测A呢
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4楼2014-07-09 21:30:53
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-08 08:40:35
反应肯定会反应，但我没看明白楼主为什么要这么做呢？有点画蛇添足。

因为需要检测B抗体的效价，但现在B抗体全部都标记了HRP所以没法检测。就想看看这样能检出来不
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5楼2014-07-16 15:07:55
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by panda73 at 2014-07-03 22:50:28
当然会，既然B已经标记HRP了，为什么还要用抗B-HRP?

因为是要检B抗体的，但现在B抗体全部标记上了HRP，就想这样试试
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6楼2014-07-16 15:09:20
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaocunyang at 2014-07-09 21:30:53
哎  肯定会有呀 你为什么要用B的抗体去检测A呢

说错了，检的是B-HRP，反正结果出来了，两种方式OD值差不多
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7楼2014-07-16 15:11:29
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雨中毛毛虫

金虫 (初入文坛)
★
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做个对照看看差异，呵呵
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8楼2014-07-29 08:22:36
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jinjiniao8198

铜虫 (小有名气)
★
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标记的B-HRP抗体检测，既然已经有辣根过氧化物酶，可以直接加底物显色了呀
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10楼2014-07-30 08:46:14
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