24小时热门版块排行榜    

查看: 1674  |  回复: 35
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Renjingyu

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取 已有10人参与

从平板上挑斑摇菌竟然提不出质粒是怎么回事?
回复此楼
即将加入研究生的大军,迷茫!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)


Renjingyu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-30 21:05:59
引用回帖:
17楼: Originally posted by Renjingyu at 2014-06-30 10:43:39
不是很亮,但挑了5个斑都有很浅的条带...

你这个很有可能是假阳性的,所以不是你培养基或者提质粒什么的问题。一般菌P要很亮才可能是阳性菌。重新连接转化吧

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
20楼2014-06-30 12:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 36 个回答

shaohe2013

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同样表示好惊讶,确定培养基没问题吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-28 10:40:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shaohe2013 at 2014-06-28 10:40:38
同样表示好惊讶,确定培养基没问题吗?

转化--涂板--菌p--摇菌 其中菌落pcr验证正确,就是摇不出菌,有没有可能我的转化做的就不对?我确定培养基是没问题的
即将加入研究生的大军,迷茫!
3楼2014-06-28 10:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-06-28 17:01:56
1、你到底是菌要摇出来没有?如果没有,要考虑你的培养基,还有你是否有挑到克隆,以及你摇菌的转速和时间
2、抽不出质粒的话,检查一下你所用的试剂是否有问题,自己的操作是否有出现错误
3、既然菌液PCR都出来了,那么可以肯定基本是克隆上了,除非你的引物不特异,出现了假阳性
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-06-28 13:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见