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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取 已有10人参与

从平板上挑斑摇菌竟然提不出质粒是怎么回事?
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即将加入研究生的大军,迷茫!
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shaohe2013

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同样表示好惊讶,确定培养基没问题吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-28 10:40:38
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shaohe2013 at 2014-06-28 10:40:38
同样表示好惊讶,确定培养基没问题吗?

转化--涂板--菌p--摇菌 其中菌落pcr验证正确,就是摇不出菌,有没有可能我的转化做的就不对?我确定培养基是没问题的
即将加入研究生的大军,迷茫!
3楼2014-06-28 10:48:11
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-06-28 17:01:56
1、你到底是菌要摇出来没有?如果没有,要考虑你的培养基,还有你是否有挑到克隆,以及你摇菌的转速和时间
2、抽不出质粒的话,检查一下你所用的试剂是否有问题,自己的操作是否有出现错误
3、既然菌液PCR都出来了,那么可以肯定基本是克隆上了,除非你的引物不特异,出现了假阳性
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-06-28 13:02:40
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-28 13:02:40
1、你到底是菌要摇出来没有?如果没有,要考虑你的培养基,还有你是否有挑到克隆,以及你摇菌的转速和时间
2、抽不出质粒的话,检查一下你所用的试剂是否有问题,自己的操作是否有出现错误
3、既然菌液PCR都出来了 ...

没有摇出来菌,培养基也是没有问题的,因为别人也有在用,都没有问题!
即将加入研究生的大军,迷茫!
5楼2014-06-28 14:54:43
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-29 17:31:28
引用回帖:
5楼: Originally posted by Renjingyu at 2014-06-28 14:54:43
没有摇出来菌,培养基也是没有问题的,因为别人也有在用,都没有问题!...

那应该不会是噬菌体污染吧?试着查一下该菌生长的最适温度,时间,转速等,改变一下摇菌的方法
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
6楼2014-06-28 17:30:13
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长相思

银虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-28 22:59:14
亲哥!是不是培养基里面加了抗生素罗!别人用他培养的不同的细菌当然可以啊。你培养的细菌没这个抗生素抗性怎么长。你检查下吧。或者你加错抗生素了。
未来很美好
7楼2014-06-28 21:33:52
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 长相思 at 2014-06-28 21:33:52
亲哥!是不是培养基里面加了抗生素罗!别人用他培养的不同的细菌当然可以啊。你培养的细菌没这个抗生素抗性怎么长。你检查下吧。或者你加错抗生素了。

用的都是大肠杆菌

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
即将加入研究生的大军,迷茫!
8楼2014-06-28 22:11:22
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-28 17:30:13
那应该不会是噬菌体污染吧?试着查一下该菌生长的最适温度,时间,转速等,改变一下摇菌的方法...

一直用的都是大肠杆菌,第一次出现这种情况

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
即将加入研究生的大军,迷茫!
9楼2014-06-28 22:12:53
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)


Renjingyu(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 20:49:58
菌P条带亮度怎么样?高亮吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
10楼2014-06-29 00:16:29
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