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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取
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怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这种情况，要么加错抗生素，要么抗生素加多了
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31楼2014-07-16 13:12:01
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烟雨莫问

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也出现过这个问题，当时是载体连接的是一个cas9基因，各种方法都抽提不出来质粒，分析的原因可能是启动子太强，导致的自身降解。再后来这个课题别人接手了，我没继续关注。
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32楼2014-07-16 14:40:23
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
28楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-07-16 08:50:54
质粒浓度太低，建议精抽后酶切...

楼主，打算精抽，1.5ml的离心管摇不起来菌，现在改换试管了，楼主，我又做了连接，转化，发现平板上干干静静，都没有长，这次我加了氨苄，卡纳，由于之前平板上长得菌落太多。怎么回事，？
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踏实
33楼2014-07-17 20:10:17
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
33楼: Originally posted by hajierlove at 2014-07-17 20:10:17
楼主，打算精抽，1.5ml的离心管摇不起来菌，现在改换试管了，楼主，我又做了连接，转化，发现平板上干干静静，都没有长，这次我加了氨苄，卡纳，由于之前平板上长得菌落太多。怎么回事，？...

我不是楼主。。。。
你讲的很乱，麻烦讲清楚一点以便给你解答
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
34楼2014-07-18 10:14:40
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
34楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-07-18 10:14:40
我不是楼主。。。。
你讲的很乱，麻烦讲清楚一点以便给你解答...

第三次被人家说表达有问题，我真的需要锻炼啦。
主要是，连接后图板，平板中加了氨苄，卡纳，几个板都没有长。不清楚是什么原因
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踏实
35楼2014-07-18 12:44:39
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
35楼: Originally posted by hajierlove at 2014-07-18 12:44:39
第三次被人家说表达有问题，我真的需要锻炼啦。
主要是，连接后图板，平板中加了氨苄，卡纳，几个板都没有长。不清楚是什么原因...

这个抗生素是不能乱加的，根据载体来加，你确定自己没有加错？
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
36楼2014-07-18 16:29:02
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