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dinding金虫 (小有名气)
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pET-28a NdeI XhoI 双酶切后电泳4条带 重复3次都一样 已有3人参与
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| 最近在做原核表达,用pET-28a构建表达载体,选用的是NdeI XhoI这两个内切酶(fermentas),50体系是pET-28a空质粒10ug,NdeI 0.25ul,XhoI 0.25ul,buffer o 5ul,第一次切了一夜,电泳有4条带,在5000bp上下各有一条较亮的条带,其他还有两条较弱的条带,以为是切的时间过长;第二次切了5个小时,电泳,还是一样的情况;第三次只切了2小时不到,电泳还是一样的情况;按到了内切酶并不多,实在搞不清什么情况,真心希望大家帮忙分析下怎么办?谢谢~~ |
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2楼2014-06-26 10:44:45
随风飘摇11
木虫 (著名写手)
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6楼2015-01-15 10:31:26
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