应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 巣式PCR
181/2返回列表12下一页
查看: 2274  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

NNUKY

银虫 (小有名气)

[求助] 巣式PCR 已有1人参与

采用巣式PCR的方法，第一轮PCR产物一定要扩增出目的条带才能进行第二轮PCR扩增吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
相信自己~~~~一直坚持！绝不放弃！！！
1楼 2014-06-26 09:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)

Thomas_HT
★ ★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励回帖交流 2014-06-27 16:38:46
本帖仅楼主可见
赞一下
9楼2014-06-27 10:33:03
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

ltfe567

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
NNUKY: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-06-26 10:41:11
是的亲，第一轮稀释n倍后为第二轮模版，第一轮没有产物第二轮根本P不出来
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-26 10:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

NNUKY

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ltfe567 at 2014-06-26 10:08:26
是的亲，第一轮稀释n倍后为第二轮模版，第一轮没有产物第二轮根本P不出来

如果第一轮PCR产物有目的条带也有杂带呢？这样能进行第二轮PCR吗？我看有些人说第一轮没做出来，第二轮能做出来呢？
赞一下 回复此楼
相信自己~~~~一直坚持！绝不放弃！！！
3楼2014-06-26 10:42:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ltfe567

木虫 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-06-26 13:17:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by NNUKY at 2014-06-26 10:42:31
如果第一轮PCR产物有目的条带也有杂带呢？这样能进行第二轮PCR吗？我看有些人说第一轮没做出来，第二轮能做出来呢？...

第一轮有杂带的话可以切胶回收作为第二轮模版吧，我做的巢式，大概流程是这样，一轮梯度PCR，摸索最佳退火温度，一轮模版稀释10倍，二轮扩增，结果条带单一明亮，可以参考下
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-26 10:45:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shellyxss

金虫 (正式写手)
楼主，我也问了和你一样的问题，里面有人回答说第一轮扩增结束不一定有结果，但是第二轮可以扩增出来，并且我就是这样的，所以我对这个问题也很好奇哈，如果楼主知道也告诉我一下吧~~~~
赞一下 回复此楼
Always be curious about nature
5楼2014-06-26 15:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

NNUKY

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ltfe567 at 2014-06-26 10:45:49
第一轮有杂带的话可以切胶回收作为第二轮模版吧，我做的巢式，大概流程是这样，一轮梯度PCR，摸索最佳退火温度，一轮模版稀释10倍，二轮扩增，结果条带单一明亮，可以参考下...

谢谢哦！
回复此楼
相信自己~~~~一直坚持！绝不放弃！！！
6楼2014-06-26 15:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-09 09:13:10
第一轮能出来肯定是好事，说明基因表达量高，你设计的引物特异性好，没出来也没关系，还有第二轮的嘛

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-26 15:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

393658000

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-09 09:12:44
不要以为巢式PCR就是万能的，不管你怎么做 先把引物设好 特异性强一点的 这样你做起来才会方便的 引物不好的话会比较麻烦的
赞一下 回复此楼
8楼2014-06-27 08:28:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

Thomas_HT
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-09 09:12:56
本帖仅楼主可见
赞一下
10楼2014-06-27 10:34:51
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 NNUKY 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭