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柠檬m97

银虫 (小有名气)

[求助] 植物 冰冻切片 已有2人参与

最近，本人在做植物根的冰冻切片，但是发现切完之后植物细胞大多破裂，很少看到完整细胞，可能是冰晶损伤。我想请问有没有什么好的办法？我想要做的是组织化学，还是我该换成石蜡切片？
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1楼 2014-06-26 09:44:30
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换石蜡切片是没有问题的，细胞完整。
冰冻切片的注意事项:
(1) 速冻：是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰  晶，最好的办法是将速冻头迅速压在组织上，冻好后就可切片。特别  适用于较脆的组织。而含有脂肪较多的组织，最好放在液氮里处理。  在液氮里冷冻要注意不要冻过头，2～3秒钟就要拿出来看一下，只要  有4/5的组织已经冻住就可以了，待冷冻头拿出后刚好全部冻住，否  则就会引起组织发脆，或冷冻头与组织分离。
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2楼2014-06-26 12:44:24
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柠檬m97

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by q317476148 at 2014-06-26 12:44:24
换石蜡切片是没有问题的，细胞完整。
冰冻切片的注意事项:
(1) 速冻：是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰  晶，最好的办法是将速冻头迅速压在组织上，冻好后就可切片。特别  适用于较脆的组织。 ...

我切的是植物的根，实验室暂时没有液氮，可以直接冷冻切片吗？我看有很多用冷冻保护剂的，需要吗？
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3楼2014-06-26 14:15:09
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多少刺猬

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

表示 有的时候做郁闷了 直接在里面对着材料做徒手切片 也能达到20um的厚度

好像真没啥办法 你用的胶是机器配套的么？冰冻切片机里面有2个速冻盘 速冻

还有切的时候匀速用力……
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4楼2014-07-01 07:55:41
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柠檬m97

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 多少刺猬 at 2014-07-01 07:55:41
表示 有的时候做郁闷了 直接在里面对着材料做徒手切片 也能达到20um的厚度

好像真没啥办法 你用的胶是机器配套的么？冰冻切片机里面有2个速冻盘 速冻

还有切的时候匀速用力……

好吧，我现在打算用石蜡切片试试了。。。感觉冰冻切片观察植物细胞显微结构还是不行。
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5楼2014-07-01 14:05:21
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笑饮江湖水

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柠檬m97 at 2014-07-01 14:05:21
好吧，我现在打算用石蜡切片试试了。。。感觉冰冻切片观察植物细胞显微结构还是不行。...

能问一下后来你植物组织的冰冻切片怎么做的？换成石蜡了吗？
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6楼2016-11-12 09:48:38
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