24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1082  |  回复: 4

chenziping

金虫 (小有名气)

[求助] 载体构建 已有2人参与

在构建载体,载体双酶切回收后,做阴性对照,自连接,转化后竟然长了很多菌落
                    同时,又做了酶切后的载体直接转化也是长了菌落
                    是不是酶切不完全,但是,酶切后我做了电泳发现载体是已经酶切了 和原载体电泳产物条带不同啊???载体是pGBKT-7,酶切位点是EcoR1,Nco1.为什么啊,请大家指点啊。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenziping(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 16:45:04
可能的原因:
1.载体回收时跑的时间有点短,切胶时污染了非载体带。
2.酶切后的载体直接转化长菌落是正常的,但是不会长太多,太多就错了。
3.切下的带有多大?
2楼2014-06-20 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-21 01:01:30
何必这么折腾,少切点质粒直接连外源片段就得了。记住重点,不必在这里浪费时间。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-20 20:11:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenziping

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-20 20:11:50
何必这么折腾,少切点质粒直接连外源片段就得了。记住重点,不必在这里浪费时间。

你好 我挑了大概四十几个单菌落 都是假阳性啊  不知道该咋办
4楼2014-06-20 22:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenziping at 2014-06-20 22:53:01
你好 我挑了大概四十几个单菌落 都是假阳性啊  不知道该咋办...

是不是方法不太对,用infusion做成功率还是挺高的
即将加入研究生的大军,迷茫!
5楼2014-06-21 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chenziping 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +4 洛神哥哥 2026-04-03 4/200 2026-04-03 19:28 by XYKJ
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 化学调剂 +9 艾志恒 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:51 by 晴空210210
[考研] 324求调剂 +4 想上学求调 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:41 by rongligao
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:19 by 蓝云思雨
[考研] 重庆大学材料与化工085600,初试370+,求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 290求调剂085701 +3 1314捧花 2026-04-02 3/150 2026-04-02 13:34 by Ecowxq666!
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 生物学327,求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-01 14/700 2026-04-01 21:07 by lijunpoly
[考研] 284求调剂 +12 小熊~~ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-29 10/500 2026-03-31 19:52 by Dyhoer
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
信息提示
请填处理意见