24小时热门版块排行榜    

查看: 1256  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chenziping

金虫 (小有名气)

[求助] 载体构建 已有2人参与

在构建载体,载体双酶切回收后,做阴性对照,自连接,转化后竟然长了很多菌落
                    同时,又做了酶切后的载体直接转化也是长了菌落
                    是不是酶切不完全,但是,酶切后我做了电泳发现载体是已经酶切了 和原载体电泳产物条带不同啊???载体是pGBKT-7,酶切位点是EcoR1,Nco1.为什么啊,请大家指点啊。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-21 01:01:30
何必这么折腾,少切点质粒直接连外源片段就得了。记住重点,不必在这里浪费时间。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-20 20:11:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenziping(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 16:45:04
可能的原因:
1.载体回收时跑的时间有点短,切胶时污染了非载体带。
2.酶切后的载体直接转化长菌落是正常的,但是不会长太多,太多就错了。
3.切下的带有多大?
2楼2014-06-20 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenziping

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-20 20:11:50
何必这么折腾,少切点质粒直接连外源片段就得了。记住重点,不必在这里浪费时间。

你好 我挑了大概四十几个单菌落 都是假阳性啊  不知道该咋办
4楼2014-06-20 22:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenziping at 2014-06-20 22:53:01
你好 我挑了大概四十几个单菌落 都是假阳性啊  不知道该咋办...

是不是方法不太对,用infusion做成功率还是挺高的
即将加入研究生的大军,迷茫!
5楼2014-06-21 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +12 医学老男孩 2026-08-13 31/1550 2026-08-14 07:47 by 医学老男孩
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见