应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带
51/1返回列表
查看: 1394  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

[求助] 水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带 已有2人参与

提取条件为：75℃水煮15min，结果如图片1所示
图片2为试剂盒提取沙门氏菌DNA的PCR结果，两次实验所用的PCR试剂，PCR条件一样，都用的通用引物
各位大神，请问为什么金黄色葡萄球菌能看到DNA的条带，却看不到PCR扩增后的条带呢？？？急!!!

水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带
图片1


水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带-1
图片2
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-17 16:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
3楼: Originally posted by 暖阳ny2 at 2014-06-18 16:58:20
是这样的，以往在相同条件下都能扩增，跑出电泳条带，现在不知道为什么就是跑不出来，试剂，方法都没有变，也做了多次重复，的确以往条带要亮一些，会是哪边出问题呢...

你按楼上说的做一下吧
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-06-19 10:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心应助！ 2014-06-17 21:33:43
P什么，16S rRNA gene? 模板都不一样，有通用引物有没有通用PCR体系，P不出来不是很正常么，你可以降低退火温度，减少引物量，还有你PCR的条带也太淡了吧如果回收技术差点，柱子差点，回收后跑电泳估计都看不到条带。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-17 20:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-06-17 20:11:23
P什么，16S rRNA gene? 模板都不一样，有通用引物有没有通用PCR体系，P不出来不是很正常么，你可以降低退火温度，减少引物量，还有你PCR的条带也太淡了吧如果回收技术差点，柱子差点，回收后跑电泳估计都看不到条带 ...

是这样的，以往在相同条件下都能扩增，跑出电泳条带，现在不知道为什么就是跑不出来，试剂，方法都没有变，也做了多次重复，的确以往条带要亮一些，会是哪边出问题呢
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-18 16:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你试一试增加模板的量，我之前遇到过类似的问题，试剂盒提取的模板能扩出来，且条带清晰。而煮沸法提取的模板，增加到3-4ul才隐约有条带。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-06-18 22:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭