24小时热门版块排行榜    

查看: 1474  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

[求助] 水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带 已有2人参与

提取条件为:75℃水煮15min,结果如图片1所示
图片2为试剂盒提取沙门氏菌DNA的PCR结果,两次实验所用的PCR试剂,PCR条件一样,都用的通用引物
各位大神,请问为什么金黄色葡萄球菌能看到DNA的条带,却看不到PCR扩增后的条带呢???急!!!

水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带
图片1


水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带-1
图片2
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-06-17 20:11:23
P什么,16S rRNA gene? 模板都不一样,有通用引物有没有通用PCR体系,P不出来不是很正常么,你可以降低退火温度,减少引物量,还有你PCR的条带也太淡了吧如果回收技术差点,柱子差点,回收后跑电泳估计都看不到条带 ...

是这样的,以往在相同条件下都能扩增,跑出电泳条带,现在不知道为什么就是跑不出来,试剂,方法都没有变,也做了多次重复,的确以往条带要亮一些,会是哪边出问题呢
3楼2014-06-18 16:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心应助! 2014-06-17 21:33:43
P什么,16S rRNA gene? 模板都不一样,有通用引物有没有通用PCR体系,P不出来不是很正常么,你可以降低退火温度,减少引物量,还有你PCR的条带也太淡了吧如果回收技术差点,柱子差点,回收后跑电泳估计都看不到条带。
2楼2014-06-17 20:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你试一试增加模板的量,我之前遇到过类似的问题,试剂盒提取的模板能扩出来,且条带清晰。而煮沸法提取的模板,增加到3-4ul才隐约有条带。
4楼2014-06-18 22:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暖阳ny2 at 2014-06-18 16:58:20
是这样的,以往在相同条件下都能扩增,跑出电泳条带,现在不知道为什么就是跑不出来,试剂,方法都没有变,也做了多次重复,的确以往条带要亮一些,会是哪边出问题呢...

你按楼上说的做一下吧
5楼2014-06-19 10:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 274求调剂 +5 S.H1 2026-03-18 5/250 2026-03-18 21:27 by guosr9609
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +9 秋有木北 2026-03-14 9/450 2026-03-18 19:49 by macy2011
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见