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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 如何从土壤中分离金黄色葡萄球菌
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爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何从土壤中分离金黄色葡萄球菌 已有2人参与

要做关于环境中的金黄色葡萄球菌，分离了很多次都失败了，不知哪位高手能够指点一下，小弟感激不尽！
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1楼 2014-06-15 19:56:28
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
你是怎样分离的？
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2楼2014-06-16 09:33:19
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wangl2037

银虫 (小有名气)
坐等学习~
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3楼2014-06-16 15:21:40
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爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2014-06-16 09:33:19
你是怎样分离的？

我用稀释涂布的方法，稀释了5个梯度，接种到血平板上，就是分离不出金黄色葡萄球菌。
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4楼2014-06-16 21:09:19
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱骨头的鱼 at 2014-06-16 21:09:19
我用稀释涂布的方法，稀释了5个梯度，接种到血平板上，就是分离不出金黄色葡萄球菌。...

血平板确实有些不太好分辨啊，怎么不用显色培养基或者Baird-Parker 平板分离？这样金葡的菌落特征要明显很多，然后选可疑的菌落做个革兰氏染色就差不多能确定是金葡了！
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5楼2014-06-17 09:15:16
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爱骨头的鱼

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2014-06-17 09:15:16
血平板确实有些不太好分辨啊，怎么不用显色培养基或者Baird-Parker 平板分离？这样金葡的菌落特征要明显很多，然后选可疑的菌落做个革兰氏染色就差不多能确定是金葡了！...

好的，之前用显色培养基了，也没有分离出来，接下来要用BP培养基分离看看。谢谢你了
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6楼2014-06-18 20:22:08
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海里的小老鼠

新虫 (初入文坛)
楼主请问您最后分离得到金葡菌了吗？我也要分离，一直做不出来，用的就是B.P培养基，求指导！

发自小木虫Android客户端
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7楼2019-05-26 08:13:40
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madynihao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

第一，金黄色葡萄球菌的检验
样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。
增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37°C培养24小时。
分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37°C培养24~48小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2~3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。
染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5~1μm。
血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌试液浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，36±1°C培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
第二，金黄色葡萄球菌肠毒素检测
金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法，在此就不一一赘述。
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8楼2019-05-27 15:48:49
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