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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2654656
注册: 2013-09-14
性别: MM
专业: 食品科学基础

[求助] 有关限制性内切酶的用法已有2人参与

我构建了T载体和目的基因的重组质粒，现在要进行双酶切获取目的基因，可是上下游用的酶速度不用，说明书上说一个只需要37度5min，另一个要37度16小时，而且两种酶的buffer也不一样，我要怎么建立酶切体系啊，两个酶和buffer是要一起加进去还是一个反应完在把另一个加进去

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1楼 2014-06-10 14:19:48

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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

应助: 57 (初中生)
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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
蓝色泡沫321(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:47:35

这种从载体上往下切最容易了，切完了跑个胶就一目了然了。如果你的酶质量好一点的话，在同一个体系里面切12 h是没啥问题的，可以先试试切过夜跑个胶回收。

2楼2014-06-10 16:36:31

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