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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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forlovefang

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么区分差别在一个bp的两条核酸的大小? 已有1人参与

我在公司合成了一段单链DNA,31bp,在5'端做了个腺苷化修饰,变成32bp,我想判断是否修饰上了,有什么方法可以辨别?请大家帮忙想想办法,谢谢
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-08 02:56:24
PAGE电泳,能区分1bp差异。
2楼2014-06-07 21:23:06
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forlovefang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Lau_Kimura at 2014-06-07 21:23:06
PAGE电泳,能区分1bp差异。

跑了,我跑了15%变性胶和8%的非变性胶,都无法清楚分开
3楼2014-06-07 21:26:11
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by forlovefang at 2014-06-07 21:26:11
跑了,我跑了15%变性胶和8%的非变性胶,都无法清楚分开...

取至少300ngDNA片段,配制20微升PCR体系(2 ul Taq Buffer,3ul dNTP,0.5 ul Taq酶),在72度反应10~20min, 后直接回收纯化加A尾的DNA片段可用于TA克隆,测序即可。
4楼2014-06-07 22:17:18
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-08 02:57:06
联系公司吧,公司可以给你提供技术支持
我之前的引物怀疑降解了,于是公司把我的引物带回去,然后跑了个电泳
1bp都分辨得出。
天行健
5楼2014-06-07 23:33:00
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