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鸦米

新虫 (小有名气)

[交流] 有人在做BiFC吗? 已有16人参与

因为我近期要做BiFC,我们实验室之前没有人做过,所以想请教曾经做过的朋友一些问题,哪位做过可以交流一下吗?
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gyesang

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-07 18:17:40
蛋白丰度不够可能是一个原因,另外,我觉得也可以考虑你究竟把荧光蛋白连接在目的蛋白的N端还是C端,这有时候也会影响荧光信号强度...

的确我的蛋白比较大,1700多个aa,荧光强度比较低,我想过可能有两个原因:
1. 荧光蛋白的N和C端,接上目的蛋白,目的蛋白影响了荧光蛋白正确构象的形成,导致互补后荧光强度低

2. 荧光蛋白的N或者C端能够形成正确的构象,但目的蛋白相互作用后,由于空间位置的关系,荧光蛋白的N端和C端,不能很好的靠在一起,彼此接近发出荧光

如果排除上述两种情况的影响
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
19楼2014-06-07 19:08:22
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starseacow

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在做,有什么问题请详细列出来

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-06-04 16:43:30
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鸦米

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-04 16:43:30
我在做,有什么问题请详细列出来

可以留下QQ吗?我刚开始做,实验室也没有人做过,可能问题会比较多
3楼2014-06-05 08:23:55
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鸦米

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-04 16:43:30
我在做,有什么问题请详细列出来

要是不方便的化我先问几个问题吧,你们是转的拟南芥原生质体吗?操作上有什么需要注意的吗?
4楼2014-06-05 08:25:54
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