应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 求助，LPS刺激RAW264.7用ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-6怎么做
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 3125  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

514097567

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助，LPS刺激RAW264.7用ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-6怎么做 已有2人参与

有人做过相关实验吗？看了好多文献，发现做的方法都不一样，细胞加板的时间，加药的剂量都不一样，救助~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-03 09:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
514097567: 金币+1 2014-06-11 17:34:14
这个是要做优化的，首先控制接种细胞数量和药的浓度（你看文献一般用多少，我之前是用Con A刺激的），设定一系列刺激培养时间进行选择，一般24h, 48h, 72h三个梯度差不多了。确定好培养时间后，再选择接种细胞数量，细胞数量确实好了你再优化药的浓度。当然条件优化的顺序不必完全按照我说的来，原则就是先固定其它的因素，只变一个因素。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-03 13:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

514097567

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-03 13:24:12
这个是要做优化的，首先控制接种细胞数量和药的浓度（你看文献一般用多少，我之前是用Con A刺激的），设定一系列刺激培养时间进行选择，一般24h, 48h, 72h三个梯度差不多了。确定好培养时间后，再选择接种细胞数量， ...

我想问一下，这个需要饥饿处理吗？我看文献，细胞是1.5×10^6, LPS浓度是1 μg/ml，有的文献说直接饥饿处理2个小时就行，但是有的说得过夜，我也搞不明白嘞
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-03 15:00:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 514097567 at 2014-06-03 15:00:37
我想问一下，这个需要饥饿处理吗？我看文献，细胞是1.5×10^6, LPS浓度是1 μg/ml，有的文献说直接饥饿处理2个小时就行，但是有的说得过夜，我也搞不明白嘞...

我做的时候没有做饥饿处理，细胞接板后直接加药刺激。你直接可以做个实验对比下，看饥饿处理与不饥饿处理的实验结果有什么差异。
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-03 16:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梓汐

铁虫 (正式写手)
您好，请问您还有264.7细胞吗？能否赠予一些  我这里也有一些细胞株 （saos-2、293T、293w、3T3-1、3T3-L1 、HeLa ） 可以交换
赞一下 回复此楼
5楼2015-04-19 19:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尘封记忆92

新虫 (初入文坛)
我现在也在做同样的实验，想请问楼主后来找到合适的实验方法了么，加LPS刺激多久后测因子呢
赞一下 回复此楼
6楼2016-09-26 09:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenweijlu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

raw细胞选5-10代的最好，1×104/孔接96孔板，贴壁24h，就是过夜，LPS 1-2ul/ml，这个根据细胞状态可调，加药物刺激，6-48h可选，离心取上清，稀释或不稀释测细胞因子
赞一下 回复此楼
7楼2016-09-26 11:07:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenweijlu

铜虫 (小有名气)
补充下 加LPS后一般是2H加药物
赞一下 回复此楼
8楼2016-09-26 11:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 514097567 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +4 鱼在水中游a 2026-04-02 7/350 2026-04-02 14:12 by baoball
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-04-02 3/150 2026-04-02 14:10 by 乔哒哒哒
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 求调剂推荐 +3 南山南@ 2026-04-01 3/150 2026-04-02 12:09 by xiaoranmu
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-27 7/350 2026-04-02 11:18 by sanrepian
[考研] 0710生物学336分求调剂 +3 kiyy 2026-04-01 3/150 2026-04-02 10:54 by w虫虫123
[考研] 材料科学与工程调剂 +18 深V宿舍吧 2026-03-30 19/950 2026-04-02 10:28 by sanrepian
[考研] 085410 一志愿211 22408分数359求调剂 +3 123456789qw 2026-03-31 4/200 2026-04-02 00:06 by 义文wang
[考研] 292求调剂 +17 木虫er12138 2026-04-01 17/850 2026-04-01 21:37 by 七度不信任
[考研] 086502化学工程342求调剂 +7 阿姨复古不过 2026-03-27 7/350 2026-04-01 16:14 by yanflower7133
[考研] 330分求调剂 +11 qzenlc 2026-03-29 11/550 2026-04-01 14:32 by chenqifeng666
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601） +6 小小机灵虫 2026-03-29 12/600 2026-03-31 16:58 by 记事本2026
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 081200-314 +3 LILIQQ 2026-03-27 4/200 2026-03-28 09:41 by 保护地球你我做�
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭