| 查看: 4034 | 回复: 12 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
huaizhenkai新虫 (小有名气)
|
[求助]
LPS致炎时的问题
|
||
|
近来查文献，发现筛选抗炎活性时. in vitro, RAW, 提前给药，孵育一段时间，再给与lps刺激，然后提取rna, 进行PCR分析 in vivo, 也是提前给药，再给与lps. 想请教一下，如果提前给药，然后lps刺激，发现NF-kb 等被抑制， 那么同时给药或者先给与LPS 刺激，然后再给药，对于研究机理上有什么区别。 我现在做的一个药物，发现在小鼠急性炎症模型上（LPS刺激），发现提前6小时给药，也能抑制tnf-a, il-6等细胞因子的表达，但是从rna 水平，又没有太大的变化；体外实验，RAW,提前给药，再用LPS刺激，结果却在蛋白水平和RNA水平都受到抑制。 有没有人帮助解释一下，可能的作用机理 同时能不能设计体外实验来证明该化合物的作用时间（？？） 比如，方案一：提前给药，共孵育30分钟，然后换了培养液(是否需要换培养液？？？)，再加入lps 刺激； 方案二：同时给药 方案三：先给与LPS刺激30分钟，换培养液（是否能换培养液？？),再给药， 这三种方案对于试验结果的解释，有什么不同呢？ 感谢大虾指教，我只有化学背景，对分子生物一头雾水：（ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞实验 |
» 猜你喜欢
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有26人回复
-
机械专硕325，寻找调剂院校
已经有4人回复
-
333求调剂
已经有7人回复
-
考研化学学硕调剂，一志愿985
已经有4人回复
-
0854控制工程 359求调剂 可跨专业
已经有9人回复
-
梁成伟老师课题组欢迎你的加入
已经有9人回复
-
化学调剂0703
已经有8人回复
-
环境工程调剂
已经有6人回复
-
326求调剂
已经有7人回复
-
一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 母亲膝关节处得了“滑囊炎”，求助治疗方法，万分感激！金币仅代表一点感激。。。
已经有10人回复
- 【问题求助】我一吃热的辣的或过于刺激的食物，就会大量的流鼻涕，而且是像有炎症的那
已经有17人回复
- 【问题求助】谁有治疗溃疡性直肠炎的方法
已经有8人回复
- 【问题求助】足跟脚踝骨质增生骨膜炎的治疗
已经有17人回复
- 【交流】用哪种试剂盒做抗炎药理实验
已经有9人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+8): 感谢参与 2011-08-22 12:39:03
lstt09nk(BioEPI+1): 2011-08-22 12:39:19
lstt09nk(金币+8): 感谢参与 2011-08-22 12:39:03
lstt09nk(BioEPI+1): 2011-08-22 12:39:19
|
哦，那你要搞明白，加药是阻断哪个通路。我导师一般不赞同先给药，作为治疗的话，还是先给LPS后给药。 方案一：先给药的目的，可能是先将LPS引起的信号通路阻断，或者延持LPS导致的效果，分析时，大部分都用延迟了LPS引起的效果。为什么这么做，是因为药物需要一定的作用时间，要是药物不能通过细胞膜，那还是比较麻烦。、 方案二：建立在方案一上的，同时孵育，可能会出现多种结果,可能LPS的效果被阻断，也可能要过会才能阻断。结果就是为了解释药物的作用时间的。 方案三：先LPS，lps导致的免疫反应都产生了，再给药，目的是为了验证这个药物在治疗LPS导致的作用上有没有效果。 你要做的话，建议方案一三都要做，至于体内和体外实验出现的不一样，很正常。 |
4楼2011-08-22 08:29:00
huaizhenkai
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 84.2
- 红花: 1
- 帖子: 113
- 在线: 25.9小时
- 虫号: 1184607
- 注册: 2011-01-06
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
5楼2011-08-22 12:19:37
sgk555
木虫 (正式写手)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 2185.7
- 散金: 105
- 红花: 4
- 帖子: 610
- 在线: 104.2小时
- 虫号: 998204
- 注册: 2010-04-16
- 专业: 药剂学
8楼2011-09-01 16:04:00
【答案】应助回帖
★ ★ ★
adslye(金币+3): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-21 15:52:46
huaizhenkai(金币+2): 三者的具体机理区别没有说的特别清楚，但是还是有帮助的 2011-08-21 19:26:59
adslye(金币+3): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-21 15:52:46
huaizhenkai(金币+2): 三者的具体机理区别没有说的特别清楚，但是还是有帮助的 2011-08-21 19:26:59
|
那当然不同啊。 提前给药，先拟制，再给LPS当然没有多大的效果啊（这相当于吃保健品）。 先LPS，炎症产生了，再给药物治疗，这就想到与临床上治疗。 同时给药，意义不大，说实话。 我也是做炎症痛，我主要是做动物实验，细胞实验导师不推荐做。 LPS导致炎症痛的机理就是通过增加NF kappa B的这个途径的。我最近也做了这么一篇文章。都在写了。 |
2楼2011-08-20 10:32:05
huaizhenkai
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 84.2
- 红花: 1
- 帖子: 113
- 在线: 25.9小时
- 虫号: 1184607
- 注册: 2011-01-06
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2011-08-21 19:28:36
6楼2011-08-23 08:15:52
huaizhenkai
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 84.2
- 红花: 1
- 帖子: 113
- 在线: 25.9小时
- 虫号: 1184607
- 注册: 2011-01-06
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
7楼2011-08-23 13:54:34
9楼2012-02-27 19:20:35
10楼2012-02-27 19:21:38
20