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huaizhenkai新虫 (小有名气)
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[求助]
LPS致炎时的问题
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近来查文献，发现筛选抗炎活性时. in vitro, RAW, 提前给药，孵育一段时间，再给与lps刺激，然后提取rna, 进行PCR分析 in vivo, 也是提前给药，再给与lps. 想请教一下，如果提前给药，然后lps刺激，发现NF-kb 等被抑制， 那么同时给药或者先给与LPS 刺激，然后再给药，对于研究机理上有什么区别。 我现在做的一个药物，发现在小鼠急性炎症模型上（LPS刺激），发现提前6小时给药，也能抑制tnf-a, il-6等细胞因子的表达，但是从rna 水平，又没有太大的变化；体外实验，RAW,提前给药，再用LPS刺激，结果却在蛋白水平和RNA水平都受到抑制。 有没有人帮助解释一下，可能的作用机理 同时能不能设计体外实验来证明该化合物的作用时间（？？） 比如，方案一：提前给药，共孵育30分钟，然后换了培养液(是否需要换培养液？？？)，再加入lps 刺激； 方案二：同时给药 方案三：先给与LPS刺激30分钟，换培养液（是否能换培养液？？),再给药， 这三种方案对于试验结果的解释，有什么不同呢？ 感谢大虾指教，我只有化学背景，对分子生物一头雾水：（ |
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 细胞实验 |
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sgk555
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8楼2011-09-01 16:04:00