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huaizhenkai

新虫 (小有名气)

[求助] LPS致炎时的问题

近来查文献,发现筛选抗炎活性时.
in vitro, RAW, 提前给药,孵育一段时间,再给与lps刺激,然后提取rna, 进行PCR分析
in vivo, 也是提前给药,再给与lps.

想请教一下,如果提前给药,然后lps刺激,发现NF-kb 等被抑制,
那么同时给药或者先给与LPS 刺激,然后再给药,对于研究机理上有什么区别。

我现在做的一个药物,发现在小鼠急性炎症模型上(LPS刺激),发现提前6小时给药,也能抑制tnf-a, il-6等细胞因子的表达,但是从rna 水平,又没有太大的变化;体外实验,RAW,提前给药,再用LPS刺激,结果却在蛋白水平和RNA水平都受到抑制。

有没有人帮助解释一下,可能的作用机理
同时能不能设计体外实验来证明该化合物的作用时间(??)

比如,方案一:提前给药,共孵育30分钟,然后换了培养液(是否需要换培养液???),再加入lps 刺激;
方案二:同时给药
方案三:先给与LPS刺激30分钟,换培养液(是否能换培养液??),再给药,

这三种方案对于试验结果的解释,有什么不同呢?
感谢大虾指教,我只有化学背景,对分子生物一头雾水:(
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huaizhenkai

新虫 (小有名气)

谢谢!但是这样理解是不是建立在体内水平基础上的,文献中体外细胞实验中,大部分还是先加药后LPS的唉?
好好学习,天天向上!
3楼2011-08-21 19:28:36
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huaizhenkai

新虫 (小有名气)

好,谢谢!那你的阳性对照药物用的是什么?
好好学习,天天向上!
5楼2011-08-22 12:19:37
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huaizhenkai

新虫 (小有名气)

哦,好,谢谢~
好好学习,天天向上!
7楼2011-08-23 13:54:34
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