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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TNF-α的检测方法
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中华魂4466

银虫 (初入文坛)

[求助] TNF-α的检测方法 已有1人参与

各位师哥师姐好，我是新人呐。现在我师姐让我买引物测TNF-α，对象是小鼠脑血管。TNF-α不是RNA也不是DNA，是蛋白，怎么用引物做PCR？望高手指点些啊！
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没有过不去的坎，回头一下继续向前！
1楼 2013-08-19 15:13:02
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seawind121

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
中华魂4466: 金币+5, ★★★很有帮助, 有点明白了 2013-08-20 22:58:19
做半定量RT-PCR 或者qRT-PCR. 提取细胞的RNA反转录成cDNA，用你合成的引物做PCR检测即可。
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2楼2013-08-20 00:29:11
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中华魂4466

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by seawind121 at 2013-08-20 00:29:11
做半定量RT-PCR 或者qRT-PCR. 提取细胞的RNA反转录成cDNA，用你合成的引物做PCR检测即可。

首先谢谢你的回答，接着还是这个问题，鼠TNF-α对应的引物是什么？有商家卖这种引物吗？还是得自己合成？
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没有过不去的坎，回头一下继续向前！
3楼2013-08-20 23:06:00
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seawind121

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 中华魂4466 at 2013-08-20 23:06:00
首先谢谢你的回答，接着还是这个问题，鼠TNF-α对应的引物是什么？有商家卖这种引物吗？还是得自己合成？...

鼠TNF-α的cDNA因序列可以自己在NCBI里查到，查到后就可以自己设计合成上游和下游引物了，设计好后 让公司帮你合成就好了。然后用你合成的引物做pcr.
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4楼2013-08-21 05:30:13
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kevin_1990

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

TNF-a有其对应的mRNA片段，提取RNA，合成cDNA，进行扩增，做定量PCR，看基因表达水平
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5楼2015-04-12 15:59:40
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