应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 求教大肠与酵母表达后的杂质问题~
91/1返回列表
查看: 1514  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xzgood8888

铁虫 (小有名气)

[求助] 求教大肠与酵母表达后的杂质问题~ 已有1人参与

如题，为什么同样表达一种蛋白，但使用了不同表达系统——大肠杆菌和毕赤酵母，后续的纯化工艺中一个使用了阴离子交换一个用的是阳离子交换？而且都是Binding-elute模式？是两种表达体系产生的杂质不同吗？这些杂质各有什么特点呢?请各位大侠解答~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
自己好好的!
1楼 2014-05-19 17:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lim1896

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为宿主菌自身还会有许多蛋白的表达，酵母本身也是有些许分泌蛋白的表达，另外，死亡菌体也会释放一些蛋白，所以便造成了杂蛋白的存在；再者，使用大肠杆菌表达时，若不是表达的分泌蛋白，需要对菌体破壁获得目的蛋白，这样又造成了杂蛋白含量的上升。
再说到杂蛋白的种类，因为不同的表达体系，不同的菌种，自身的蛋白组成是有区别的，所以杂蛋白的含量和一些种类会有区别，简单来讲，鱼肚子里的东西和人肚子里的东西虽然有些东西是一样的，但是二者的区别也是很明显的，具体的，应该不用多说了吧
希望对楼主有用
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-20 10:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyhwb

木虫 (初入文坛)
可能是酵母表达系统存在一些翻译后修饰，如糖基化等，使其等电点发生改变。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-20 18:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzgood8888

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lim1896 at 2014-05-20 10:20:40
因为宿主菌自身还会有许多蛋白的表达，酵母本身也是有些许分泌蛋白的表达，另外，死亡菌体也会释放一些蛋白，所以便造成了杂蛋白的存在；再者，使用大肠杆菌表达时，若不是表达的分泌蛋白，需要对菌体破壁获得目的蛋 ...

同意大侠的说法，但我想问的是不同表达系统所产生的杂质各有什么特质，比如CHO 的HCP通常为酸性蛋白，聚体通常疏水性能很强等这类可以供选择层析方法时考虑的特点。
赞一下 回复此楼
自己好好的!
4楼2014-05-22 13:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzgood8888

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happyhwb at 2014-05-20 18:16:53
可能是酵母表达系统存在一些翻译后修饰，如糖基化等，使其等电点发生改变。

能具体说说会有什么样的改变吗？
赞一下 回复此楼
自己好好的!
5楼2014-05-22 13:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eroitoei

新虫 (正式写手)
显然是表达系统不一样
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-22 16:09:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyhwb

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xzgood8888 at 2014-05-22 13:27:24
能具体说说会有什么样的改变吗？...

酵母中存在糖基化修饰（-N糖基化、-O糖基化），糖基化的结果会使蛋白带上唾液酸，从而蛋白等电点降低。此外，你用不同的表达系统，不知道是否有带标签，如果带的标签不一样（如果没有切除标签)，也会影响蛋白的一些性质。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2014-05-22 18:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heylixing

铁虫 (正式写手)
酵母的糖基化杂质特别麻烦
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-29 20:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eroitoei

新虫 (正式写手)
两种表达体系产生的杂质不同
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-30 12:09:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xzgood8888 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭