24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wbs21cn

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 398.5
帖子: 36
在线: 22小时
虫号: 1387081
注册: 2011-09-02
专业: 肿瘤诊断

[求助] 大神们可否愿意挑战这个片段的引物设计，真心有点难已有4人参与

最近设计一个片段的引物，真的好难，求大神们赐招啊。高GC含量，高重复序列。设计了几对出去，都扩不出来
AGCAGTGATAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGCAACAGCAGTGATAGCAGTGAAAGCAGTA
ATAGTAGTGACAACAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAG
TAATAGTAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAATAGCAGC
GACAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCA
GTGATAGCAGCAACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTAATAGTAGTGACAG
CAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGAC
AGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTG
ATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGATAGCAGTGAAAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAG
CAATAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCGATAGC
AGTGACAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGATAGCAGTGACA
GCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGTGAAAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGA
CAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGATAGCAGC
GACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGATAGTAGTGATAGCA
GTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAG
CAATGAAAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGCGAC
AGCAGTGATAGCAGTGACAGCACATCTGACAGCAATGATGAGAGTGACAGCCAGAGCAAGTCTGGTAACG
GTAACAACAATGGAAGTGACAGTGACAGTGACAGTGAAGGCAGTGACAGTAACCACTCAACCAGTGATGA
TTAGAACAAAAGAAAAACCCGTAAGATTCCTTTTGTGAAAAGTTT
谢谢各位大神了。

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

各位大神帮帮忙设计一对引物。已经有20人回复
大神们，帮忙设计个引物吧！RT-PCR引物设计（大鼠MUC5ac) 已经有11人回复

1楼 2014-05-16 10:27:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

专家经验: +24
MolEPI: 31
应助: 599 (博士)
贵宾: 2.689
金币: 24334.9
散金: 1088
红花: 88
沙发: 2
帖子: 2327
在线: 623.1小时
虫号: 849017
注册: 2009-09-16
性别: GG
专业: 细胞信号转导
管辖: 分子生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wbs21cn(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-06-25 08:31:39

如果这个基因是做表达的话，基因要么从cDNA中克隆获得，要么从已知载体亚克隆获得，如果从已知载体亚克隆获得，引物设计比较随意，不需要特别的设计，只要把ORF包括进去就行，如果没有该基因的模板需要从cDNA里面克隆，有可能会扩不到条带

所以最好是，能找到含有这个基因序列的质粒载体然后再亚克隆到你的目标表达载体上，你可以先从cDNA里面扩增试试，不行的话可以考虑到公司买基因，据我了解的话，买个基因，最低大概可以400-500块钱就可以搞定