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[求助]
大神们可否愿意挑战这个片段的引物设计，真心有点难 已有4人参与
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最近设计一个片段的引物，真的好难，求大神们赐招啊。高GC含量，高重复序列。设计了几对出去，都扩不出来 AGCAGTGATAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGCAACAGCAGTGATAGCAGTGAAAGCAGTA ATAGTAGTGACAACAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAG TAATAGTAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAATAGCAGC GACAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCA GTGATAGCAGCAACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGTGATAGCAGTAATAGTAGTGACAG CAGCAATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGAC AGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTG ATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGATAGCAGTGAAAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAG CAATAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCGATAGC AGTGACAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGATAGCAGTGACA GCAGCAACAGCAGTGACAGCAGTGACAGCAGTGAAAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGA CAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCAATAGCAGTGATAGCAGC GACAGCAGTGATAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGCGATAGCAGCGACAGCAGCGATAGTAGTGATAGCA GTGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGACAGCAGTGACAG CAATGAAAGCAGCGACAGCAGTGACAGCAGCGATAGCAGTGACAGCAGCAACAGCAGTGACAGCAGCGAC AGCAGTGATAGCAGTGACAGCACATCTGACAGCAATGATGAGAGTGACAGCCAGAGCAAGTCTGGTAACG GTAACAACAATGGAAGTGACAGTGACAGTGACAGTGAAGGCAGTGACAGTAACCACTCAACCAGTGATGA TTAGAACAAAAGAAAAACCCGTAAGATTCCTTTTGTGAAAAGTTT 谢谢各位大神了。 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
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如果这个基因是做表达的话，基因要么从cDNA中克隆获得，要么从已知载体亚克隆获得，如果从已知载体亚克隆获得，引物设计比较随意，不需要特别的设计，只要把ORF包括进去就行，如果没有该基因的模板需要从cDNA里面克隆，有可能会扩不到条带 所以最好是，能找到含有这个基因序列的质粒载体然后再亚克隆到你的目标表达载体上，你可以先从cDNA里面扩增试试，不行的话可以考虑到公司买基因，据我了解的话，买个基因，最低大概可以400-500块钱就可以搞定 |
4楼2014-05-16 12:45:00
jurkat.1640
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一眼望去就是重复序列，不是拿大家寻开心的吧
5楼2014-05-16 15:59:08
6楼2014-06-24 15:24:39
7楼2014-06-24 15:58:17
10楼2014-06-27 16:52:03