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追随自由的心

金虫 (正式写手)

[求助] 沉淀DNA时,用到的醋酸铵溶液pH是多少? 已有2人参与

如题,查看了几篇文章,和方法,都是只是提供了醋酸铵的浓度,但是没有说明pH值。
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3 2014-05-14 16:06:12
追随自由的心: 金币+3, 有帮助 2014-05-14 21:20:30
这个NH4Ac的pH不是很关键,这个东西天然的pH就在7左右,调不调无所谓。
正如你看到的,大家都是直接溶解了用了,
了不起有讲究的,调到pH7.0,这个调pH就相当纠结了,稍不小心就过了。
2楼2014-05-14 15:17:44
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
追随自由的心: 金币+2, 有帮助, 醋酸钠缓冲液我也配了,pH是5.2.觉得醋酸铵也应该是调到这个值,因为我是提取植物基因组DNA,用CTAB的方法,CTAB缓冲液pH是5,所以觉得应该给一个酸环境 2014-05-14 21:19:02
LZ为什么不用醋酸钠沉淀呢?效果挺好的~~
大家相互帮助哈
3楼2014-05-14 20:48:18
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追随自由的心

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-05-14 20:48:18
LZ为什么不用醋酸钠沉淀呢?效果挺好的~~

谢谢你的回复,醋酸钠缓冲液我也配了,pH是5.2.觉得醋酸铵也应该是调到这个值,因为我是提取植物基因组DNA,用CTAB的方法,CTAB缓冲液pH是5,所以觉得应该给一个酸环境
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4楼2014-05-14 21:19:38
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追随自由的心

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-05-14 15:17:44
这个NH4Ac的pH不是很关键,这个东西天然的pH就在7左右,调不调无所谓。
正如你看到的,大家都是直接溶解了用了,
了不起有讲究的,调到pH7.0,这个调pH就相当纠结了,稍不小心就过了。

我是想调到5左右的,给DNA提供一个酸环境
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5楼2014-05-14 21:20:17
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
追随自由的心: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-14 22:35:13
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-06-01 16:54:33
为什么DNA沉淀要调到酸性?这是你一厢情愿,又是异想天开。
常规用于核酸醇沉的一价盐离子,有Li,Na,NH4+,目的是屏蔽核酸这个含有大量磷酸的多聚物,聚集在一起时的负电荷排斥力。其中除了NaAc使用时需要调pH到5.2,剩下的都不需要调pH,虽然为什么恰恰是NaAc需要调pH,其他的不需要,是不是与Ac这个弱酸根有关等等我不知道,也没有考证,但是肯定与CTAB使用时pH为5没有关系~
6楼2014-05-14 21:39:21
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追随自由的心

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-05-14 21:39:21
为什么DNA沉淀要调到酸性?这是你一厢情愿,又是异想天开。
常规用于核酸醇沉的一价盐离子,有Li,Na,NH4+,目的是屏蔽核酸这个含有大量磷酸的多聚物,聚集在一起时的负电荷排斥力。其中除了NaAc使用时需要调pH到 ...

谢谢哈,现在有答案了!
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7楼2014-05-14 22:35:03
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