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streptavidin银虫 (初入文坛)
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求助关于如何消除selex过程中非特异性序列的方法已有2人参与
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各位大虾,我正在研究应用selex方法筛选hCG适体的课题。但是无法消除非特异性结合的序列,而且这些非特异性序列在全部ssDNA中占了大多数。 我使用酶标板包被hCG,BSA封闭的方法,将ssDNA加入到酶标板上,结合过夜后,用washing buffer洗涤,然后用Urea洗脱,我使用了内标的方法来检测非特异性的序列是否已经洗脱完全,可是在电泳验证中内标条带始终出现。 最近我也使用了很多的方法来消除非特异性的序列,包括增加洗涤次数,提高洗涤中离子强度等,都不能起到很好的效果。 有没有去除非特异性序列具体的操作流程,操作细节。希望大虾们指导。 |
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