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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大家帮忙看下，这个拖带这么严重，但是视乎没有条带，什么情况？是不是加的量太大了？
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liuyil

银虫 (小有名气)

[求助] 大家帮忙看下，这个拖带这么严重，但是视乎没有条带，什么情况？是不是加的量太大了？ 已有1人参与

大家帮忙看下，这个拖带这么严重，但是视乎没有条带，什么情况？是不是加的量太大了？两边是一些随机连接的DNA片段，大小不一，大家出出注意！

大家帮忙看下，这个拖带这么严重，但是视乎没有条带，什么情况？是不是加的量太大了？
Administrator 2014-04-24 21hr 26min.jpg
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未来不知道会怎么样，做好当下最重要。
1楼 2014-04-25 09:40:27
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liuyil

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-25 07:26:26
呀呀，别搞这么客气，能解决问题就行
一般而言连接产物看不大出来大小的，你若想看大小，直接TA克隆了，用菌落PCR在你得到的克隆里面看，这个也能反映问题。
就是这有一点bias，小片段更容易连接，你要是较真，可 ...

之前看您生气了，我就觉得我这人太笨了，呵呵，以后可能还会麻烦前辈们!
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未来不知道会怎么样，做好当下最重要。
22楼2014-04-27 20:57:30
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liuyil

银虫 (小有名气)
补充：这里面还有连接酶这些，连接后的产物，未纯化，只是想先跑个胶看下条带的分布，谢谢
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未来不知道会怎么样，做好当下最重要。
2楼2014-04-25 10:29:29
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liuyil

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuyil at 2014-04-25 03:29:29
补充：这里面还有连接酶这些，连接后的产物，未纯化，只是想先跑个胶看下条带的分布，谢谢

补充：连接体系中是一些长度在20-70 bp的DNA小片段，然后在T4 DNA连接酶的作用下进行连接，14 度，24 h，将连接产物直接跑1%的琼脂糖电泳，图就这样了，打下们帮忙分析下！
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未来不知道会怎么样，做好当下最重要。
3楼2014-04-25 11:54:44
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
@天使托   @blackrose8089   @凌波丽   @cicelyzh   @biostar2009   帮忙解决一下
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-04-25 12:46:05
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